摘要：大黄鱼虹彩病毒(large yellow croaker iridovirus,LYCIV)引起的虹彩病毒病是大黄鱼夏季高温期的主要流行病害之一,对大黄鱼养殖业造成巨大的经济损失,早期诊断对该病的防治具有重要意义。本研究根据大黄鱼虹彩病毒基因组序列的ORF026特异性区域设计1对特异性引物,建立了可区分LYCIV不同亚型(RSIV-Ia和RSIV-Ib亚型)的PCR检测方法,该方法对RSIV-Ib亚型具有高度的检测特异性,对真鲷虹彩病毒、石斑鱼虹彩病毒、鳜蛙虹彩病毒、黄鳍鲷腹水病虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒等病原均无交叉反应;检测灵敏性高,灵敏度可达到102copies/uL;对19份宁德大黄鱼养殖海区的临床阳性样品检测发现,15份样品呈RSIV-Ia亚型,4份样品呈RSIV-Ib亚型,说明该方法能够有效区分大黄鱼虹彩病毒两种不同亚型。

摘要：本试验旨在对迟钝爱德华菌EIB202 PuAH基因进行克隆表达,并对其部分特性进行分析。根据GenBank中发表的迟钝爱德华菌PuAH基因序列(登录号:CP001135,CDS编号:ETAE_0818)设计引物,克隆并通过表达载体pET32a重组表达该基因所编码的蛋白,纯化表达产物并制备兔抗血清,采用ELISA、Western blotting、溶血试验、菌体凝集试验分析所得融合蛋白的特性。结果显示,所得融合蛋白主要以可溶性蛋白的形式表达,蛋白分子质量约为42ku;具有免疫原性和抗原性,对鳗鲡红细胞不具溶血性,但融合蛋白抗血清对迟钝爱德华菌EIB202膜蛋白提取物的溶血性有一定的抑制作用,且可以凝集迟钝爱德华菌EIB202菌体。

摘要：根据已发表的猪链球菌2型的cps2j基因序列,设计合成上游标记生物素的1对引物和1条标记地高辛的特异性探针,建立了该菌的PCR-ELISA检测方法。方法利用PCR仪作为杂交场所,并对几个主要条件参数进行优化,结果显示在鲑鱼精DNA浓度1.6mg·mL-1、变性温度为94℃、变性时间为1min、探针浓度为0.5umol·mL-1、杂交温度55℃、杂交时间1min、一抗作用时间45min、二抗作用时间40min时检测方法敏感性最好,特异性最强。通过对17个阴性样本检测,测得平均值为0.057,方差为0.047,计算得临界值为0.198。