摘要：五、应用软件设计中的问题1.哪一种程序好?在本系统两台互为备用的计算机中,分别采用了两种不同工作方式的程序:一种是查询方式,一种是中断方式。希望通过实践来检验哪一种程序好?下面分别谈谈两种方式的程序设计。(1)查询方式:CPU 在进行数据交换时。

摘要：铅阴极生产线是我厂铅精炼车间制造铅电解阴极板的关键设备。它于1981年5月投入运行,代替了原来的手工操作,减轻了劳动强度,提高了工作效率。但是,由于采用光电输入可控硅输出的电路控制,脉冲形成线路设计过于简单,特别是未考虑抗干扰问题,经不起周围大设备开动时引起的干扰;分立元件接点多,工艺设计差,加上环境恶劣,造成接触不良;输入、反馈信号不可靠。

摘要：针对新疆平作区棉花残膜回收机起膜、拾膜分步作业造成残膜回收率低、含杂率高的问题,提出了起膜、拾膜协同作业的思路,设计了一种铲齿组合式(同步起膜、拾膜)残膜回收装置。通过对起膜铲起膜机理进行分析,确定了起膜铲导曲面参数方程和主要结构参数;通过对捡拾滚筒拾膜过程运动及受力分析,确定了拾膜齿杆能够"扎"起残膜的必要条件。运用Design-Expert 8.0.6数据分析软件中心组合试验方法对组合式残膜捡拾装置的关键参数进行了试验,建立了起膜铲入土角、捡拾滚筒转速、机具前进速度与残膜回收率和含杂率的三元二次回归模型。采用非线性优化计算方法,对影响因素进行综合优化计算。试验结果表明:当起膜铲入土角为30°、拾膜滚筒转速为120 r/min、机具前进速度为1.0 m/s时,残膜回收率为90.3%,含杂率为4.1%,比起膜、拾膜分步作业条件下的残膜回收率提高了5.3个百分点,含杂率降低了4.8个百分点。试验指标均达到了国家和行业标准要求,试验结果满足设计要求。

摘要：目的建立多房棘球蚴（泡球蚴）感染小鼠肝脏丝氨酸蛋白酶抑制基因（Serpina3g）实时荧光定量PCR（RT—qPCR）的检测方法及与常规RT—PCR检测方法的比较。方法肉眼直视下肝脏穿刺注射100μl泡球蚴组织匀浆液建立泡球蚴感染小鼠模型，3个月后将小鼠处死，Trizol法提取肝脏总RNA，反转录获得cDNA。依据Serpina3g的编码基因（NM_009251）保守序列，通过Primer5软件设计定量引物，以β—actin作为内参。以健康小鼠肝脏获得的cDNA依次10倍梯度稀释制备标准品（1×10^2～1×10^6pg），利用SYBR Green RT-qPCR方法检测Serpina3g基因，然后根据cDNA浓度与循环值（Ct）的线性关系，绘制标准曲线，确定RT—qPCR检测的最佳条件和重复性；并将RT—qPCR结果与常规RT—PCR琼脂糖凝胶电泳结果进行特异性、灵敏度和定量等方面的比较。结果筛选出Serpina3g基因定量引物，最佳退火温度为56．g℃；RT—qPCR无非特异性扩增，标准品及样品熔解温度均在80．5℃，熔解峰单一；标准曲线斜率为-2．833（效率），相关系数r=0．996：5个不同梯度的样本（1×10^2～1×10^6pg）重复检测5次均为阳性，变异〈5％；mRNA检出限为1×10^2pg，总RNA在1×10^2-1×10^6pg内均可以进行扩增；常规RT-PCR方法mRNA检出限仅为1×10^6pg。结论成功建立了小鼠源Serpina3g的RT—qPCR检测方法，在特异性、灵敏度、重复性和定量方面优于常规RT—PCR。

摘要：目的从新疆株细粒棘球蚴中克隆细胞外信号调节激酶（EgERK1）基因，进行序列测定、生物信息学分析，蛋白表达及功能初步鉴定。方法设计特异性引物，从新疆株细粒棘球蚴中提取总RNA，RT—PCR法扩增EgERKl基因，构建pET28a—EgERK1原核表达质粒，测序确定序列并进行生物信息学分析。构建正确的pET28a-EgERK1原核表达质粒，经诱导、表达EgERK1重组蛋白，聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹检测其生物学功能。结果RT-PCR扩增出的条带经测序，结果显示其长度为1125bp，编码374个氨基酸，等电点为6．34，BLAST比对结果提示为一新基因，命名为EgERKl（EU701008）。同源性比较表明，EgERK1与多房棘球绦虫ERK基因（EmMPK1）同源性为95．45％，与线虫、酵母、果蝇和人类等ERK基因的同源性为43．04％～61．88％。进化树分析发现EgERKl和EmMPKl相聚集。功能分析预测EgERKl具有ERK类激酶T—X—Y结构保守区和酶激活功能域。Western印迹显示，原核诱导表达的EgERKl重组蛋白能与抗人ERK1／2抗体发生特异性免疫反应。结论成功克隆细粒棘球蚴EgERKl新基因，发现EgERK1重组蛋白具有与ERK1／2抗体结合的功能，为进一步研究该基因在寄生虫与宿主相互作用中的功能奠定基础。

摘要：目的探讨肝囊型包虫病患者外周血单个核细胞（PBMC）表面程序性死亡受体配体1（PD—L1）的表达及其与血清IFN-γ水平之间的关系。方法回顾性分析2010年6月至2011年2月新疆医科大学第一附属医院收治的63例肝囊型包虫病患者的临床资料。根据世界卫生组织包虫病专家组包虫病标准化分型原则将患者分为肝包虫活性组（38例）和肝包虫无活性组（25例），20例肝血管瘤患者及健康志愿者作为正常对照组。采用流式细胞仪及免疫组织化学法检测PD—L1阳性表达率，ELISA法检测血清IFN-γ的表达水平。组间比较采用成组设计资料t检验和单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验，总体分布采用X2检验，PD—L1阳性表达率和IFN-γ的表达水平的相关性分析采用Pearson检验。结果流式细胞仪检测肝包虫活性组、肝包虫无活性组和正常对照组PBMC表面PD—L1的阳性表达率分别为12．1％±3．8％、10．9％±2．5％和9．1％±2．5％，肝包虫活性组与正常对照组PD—L1的阳性表达率比较，差异有统计学意义（t=3．327，P〈0．05）。免疫组织化学检测肝包虫活性组、肝包虫无活性组和正常对照组PBMC涂片中PD—L1的阳性表达率分别为11．9％±3．4％、10．6％±2．9％和9．5％±3．6％，肝包虫活性组与正常对照组PD—L1的阳性表达率比较，差异有统计学意义（t=2．470，P〈0．05）。肝包虫活性组、肝包虫无活性组和正常对照组血清IFN—γ表达分别为（141±38）μg/L、（124±32）μg/L和（105±42）μg/L，肝包虫活性组与正常对照组IFN-γ表达水平比较，差异有统计学意义（t=3．280，P〈0．05）。流式细胞仪和免疫组织化学检测PBMC的PD-L1阳性表达率与血清IFN-γ表达水平均呈明显正相关（r=0．59，0．61，P〈0．05）。结论PD—L1可能在IFN-γ的作用下发挥着促进肝包虫免疫逃避的重要作用。

摘要：目的从新疆株细粒棘球绦虫原头蚴中克隆DNA聚合酶δ小亚基EgPolD2,进行序列测定和生物信息学分析。方法设计EgPolD2特异性引物,用RT-PCR方法从细粒棘球绦虫原头蚴cDNA中克隆EgPolD2基因,然后将其克隆至pMD18-T载体,测序并进行生物信息学分析,半定量反转录PCR分析其在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡中的表达情况。结果 EgPolD2基因开放阅读框为1 218bp,编码405个氨基酸,等电点为4.74。NCBI保守功能区分析软件预测EgPolD2蛋白第113～378个氨基酸为MPP_PolD2_C结构域。登陆GenBank进行Blast比对,EgPolD2与曼氏血吸虫SmPolD2基因同源性为32.1%,与线虫和人等其他物种PolD2基因同源性在18.3%～22.8%之间。进化树分析表明EgPolD2与SmPolD2相聚集,与其他物种同源性较低。半定量RT-PCR显示,EgPolD2在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡中均有表达,且表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验成功克隆出细粒棘球绦虫EgPolD2新基因,为进一步研究抗细粒棘球绦虫药物靶标奠定了基础。

摘要：目的克隆和分析细粒棘球绦虫原头蚴发育调控基因Eg Ral基因。方法根据多房棘球绦虫Em Ral基因序列设计引物,用RT-PCR方法从细粒棘球绦虫原头蚴中克隆Eg Ral基因并将其克隆至pMD19-T载体,经测序后,与线虫、多房棘球绦虫、果蝇和人类等物种Ral基因进行比对分析。结果从细粒棘球绦虫原头蚴cDNA中克隆获得Eg Ral基因,长度为603 bp,编码200个氨基酸,等电点为8.85。经比对,Eg Ral与Em Ral同源性为99%,与线虫、果蝇和人等其他种类Ral基因同源性在47.89%～50.72%之间。进化树分析表明Eg Ral与Em Ral相聚集,与其他物种同源性较低。结论成功从细粒棘球绦虫原头蚴中克隆出Eg Ral基因,其序列具有较高的保守性。

摘要：目的建立检测泡球蚴感染小鼠IL-17的实时荧光定量RT-PCR方法,并用于泡球蚴病小鼠IL-17基因检测。方法通过腹腔注射100μl泡球蚴组织匀浆液建立泡球蚴感染小鼠模型,感染1个月后处死,提取肝脏总RNA,反转录得到cDNA;登陆GenBank,得到IL-17基因（U43088.1）全序列,选取保守序列,应用pri mer 5设计引物,β-actin作为内参,以10倍梯度稀释IL-17 PCR产物为标准品,进行实时荧光定量RT-PCR以确定方法的特异性和灵敏度;绘制标准曲线,确定IL-17基因检测的最佳条件。结果用建立的实时定量RT-PCR检测IL-17基因无非特异性扩增,各样品熔解温度均在81.0℃,熔解峰单一;mRNA检出限为1×102pg,106~102pg总RNA均有扩增;泡球蚴感染1个月后,IL-17基因表达显著增加,感染组和对照组分别为（0.008728±0.000984）和（0.003823±0.00082）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论成功建立了小鼠源IL-17基因实时定量RT-PCR检测体系。经检测,小鼠感染泡球蚴1个月后IL-17基因表达增加,表明IL-17在泡球蚴感染免疫调节中可能起重要作用。

摘要：目的从新疆株细粒棘球绦虫原头蚴中克隆PDZ结构域蛋白(EgPDZ),进行序列测定和生物信息学分析。方法设计EgPDZ基因特异性引物,用RT-PCR方法从细粒棘球绦虫原头蚴RNA中克隆EgPDZ基因并将其克隆至pMD18-T载体,测序确定序列并进行生物信息学分析。结果 RT-PCR扩增出一长度约600 bp的基因,测序显示其长度为627 bp,编码208个氨基酸,等电点为4.76,为一新基因,命名为EgPDZ。SMART功能分析预测EgPDZ蛋白16～88氨基酸为PDZ结构域。同源性比较表明,EgPDZ与多房棘球绦虫EmPDZ同源性为97.60%,与血吸虫和人等其他种类PDZ基因同源性在18.16%～26.42%之间,而PDZ结构域的序列相似度为42.47%～98.63%。进化树分析表明EgPDZ与EmPDZ相聚集,与其他物种同源性较低。结论成功克隆出细粒棘球绦虫EgPDZ新基因,为进一步研究该基因在细粒棘球绦虫与宿主相互作用中的功能奠定基础。