摘要：为了建立鉴别欧洲型和美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的荧光定量RT-PCR方法,根据欧洲型和美洲型PRRSV的M基因保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够鉴别欧洲型和美洲型PRRSV的双重双色荧光定量RT-PCR方法。该方法的重复试验表明其组内和组间的变异系数最高分别为1.30%和1.96%;灵敏性及特异性试验表明其检测下限为1×101copies/μL,而且与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性。该检测方法的建立为不同型别的PRRSV快速诊断提供了有效手段,能够应用于临床样品检测。

摘要：根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法。该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84%和1.76%;灵敏性试验表明其检测下限为10copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因。该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控。

摘要：为了明确青海省天峻地区青海血蜱传斑点热群立克次体带菌率及遗传进化特点,根据已发表的斑点热群立克次体外膜蛋白OmpA基因序列设计特异性引物,采用PCR方法对青海省天峻地区青海血蜱进行斑点热群立克次体检测,并对测定序列进行遗传进化分析。结果显示,在316个青海血蜱标本样品池中共检测到31个阳性样品,斑点热群立克次体(SFGR)带菌率为9.8%。遗传进化分析显示,TJ013与立克次体福建分离株FUJ98(AF169629)、黑龙江立克次体HL-93(AF179364)、HL-054(AF179362)及日本立克次体YM(U43795)处于同一分支;SFGR Omp A基因序列同源性分析结果显示,TJ013与立克次体福建分离株FUJ98(AF169629)同源性最高,为95.49%;与黑龙江立克次体绥芬分离株HLJ-054和虎林分离株HL-93的同源性均为91.44%;和日本立克次体YM同源性为90.24%。表明青海省天峻地区青海血蜱传斑点热群立克次体感染较为严重,应尽快制定防制措施,以免危及动物及人类健康。

摘要：为了明确青海省天峻地区青海血蜱传斑点热群立克次体带菌率及遗传进化特点,笔者根据已发表的斑点热群立克次体外膜蛋白Omp A基因序列设计特异性引物,采用PCR方法对青海省天峻地区青海血蜱进行斑点热群立克次体检测并对测定序列进行遗传进化分析。结果在316个青海血蜱标本样品池中共检测到31个阳性样品,SFGR带菌率为9.8%。遗传进化分析显示,TJ013与立克次体福建分离株FUJ98(AF169629),黑龙江立克次体HL-93(AF179364),HL-054(AF179362)及日本立克次体YM(U43795)处于同一分支;SFGR Omp A基因序列同源性分析结果显示,TJ013与立克次体福建分离株FUJ98(AF169629)同源性最高,为95.49%;与黑龙江立克次体绥芬分离株HLJ-054和虎林分离株HL-93的同源性均为91.44%;与日本立克次体YM同源性为90.24%。说明青海省天峻地区青海血蜱传斑点热群立克次体感染较为严重,应尽快制定防治措施,以免对动物及人类健康造成威胁。