摘要：以分离于纳豆中的枯草芽孢杆菌MX-6为研究对象,通过单因素试验确定温度、初始pH值、接种量、装液量及摇床转数对纳豆激酶活力的影响,应用响应面法的Box-Behnken设计对纳豆激酶发酵条件进行优化。当温度36.69℃、初始pH 6.94、接种量3.03%、装液量48.77 mL、摇床转速170.05 r/min时可获得最大的纳豆激酶溶圈直径20.71 mm,与优化前的溶圈直径相比提高35.54%,表明该模型能科学地预测纳豆激酶的合成情况。结果显示响应面法可有效、成功地优化纳豆激酶发酵条件。

摘要：从内蒙古酸马奶中分离一株对鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028具有强抑菌活性的菌株MXG-68,经个体形态、菌落形态、16S rDNA基因同源性比对及系统进化树构建,确定该菌株为植物乳杆菌。水解酶敏感性试验结果显示植物乳杆菌MXG-68所产抑菌物质为蛋白质(多肽)。通过单因素试验确定温度、初始pH、抗坏血酸、EDTA对抑菌活性影响的基础上,应用响应面法的Box-Behnken设计进行植物乳杆菌MXG-68产细菌素发酵条件的优化。当温度30.08℃、初始pH 6.94、抗坏血酸1.91μg/mL、EDTA 5.06mg/mL时可获得最大的抑菌圈直径21.42 mm,与优化前的溶圈直径相比提高46.41%,表明该模型能科学地预测细菌素的合成情况。

摘要：以传统发酵豆制品为供试材料,应用脱脂牛乳平板法和纤维蛋白平板法分离到1株纳豆激酶高产菌株MX-6,经菌落形态、菌体形态及16SrDNA基因同源性分析,确定其为枯草芽孢杆菌。通过单因素试验确定碳源、氮源、无机盐及表面活性剂对纳豆激酶活力影响的基础上,应用响应面法的Box-Behnken设计进行枯草芽孢杆菌MX-6产纳豆激酶发酵培养基的优化。当可溶性淀粉2.91%、大豆蛋白胨1.92%、氯化钙0.04%、硫酸镁0.04%、羧甲基纤维素0.39%时可获得最大的纳豆激酶溶圈直径33.87mm,与优化前的溶圈直径相比提高了56.81%,表明该模型能较好地预测纳豆激酶的合成情况。

摘要：SnRK2是ABA通路中至关重要的蛋白激酶,可通过调节下游相关蛋白质的活性来调节胁迫响应基因的表达,显著改进植物对高盐和干旱等非生物胁迫的抗性。基于SnRK2成员cDNA的UTR保守区域设计兼并引物,利用RT-PCR方法从菘蓝中克隆得到一个SnRK2全长cDNA序列,命名为ItSnRK2.1。测序显示该基因长度为1 305 bp,包含一个1 071 bp的完整开放阅读框,编码356个氨基酸,在GenBank数据库的登录号为MF423122。ItSnRK2.1蛋白激酶理论等电点为5.64,理论分子量为40.6 k D,属于亲水性蛋白,存在二个显著跨膜结构域,含有42处磷酸化位点,没有信号肽,最可能定位的位置是在细胞质上。ItSnRK2.1蛋白激酶的二级结构具有151个α-螺旋、109个无规则卷曲、66个延伸链和30个β-转角。ItSnRK2.1蛋白包含一个ATP结合位点和一个丝氨酸/苏氨酸酶活结构域,同At SnRK2.1、At SnRK2.5和St SnRK2.6蛋白亲缘关系最近,处在同一进化分枝。实时定量RT-PCR检测结果显示,ItSnRK2.1基因在菘蓝幼苗的根部表达量最高,其次是叶,茎的表达量最低;ItSnRK2.1基因积极参与高盐和干旱胁迫应答反应,但对ABA胁迫不敏感,表明该基因可能与植物抗逆境胁迫有关,且不依赖ABA调控通路。

摘要：为获得生长活力较强,能够满足发酵生产纳豆激酶要求的菌种,以OD600为评价指标,采用测定菌种生长曲线的方法优化培养基配比,利用单因素试验确定适宜菌种生长的培养基成分,并以得到的适宜条件作为五元二次旋转正交设计的零水平进行系统优化。试验结果表明:培养基成分的最优组合为葡萄糖3%、大豆蛋白胨2%、MgSO40.2%、K2HPO40.1%、KH2PO40.2%。在优化条件下,菌种培养14h后菌液的OD600值可达到2.540,较优化前提高了0.674。