摘要：为了同时检测引起猫瘟热、猫传染性鼻气管炎、猫肠道冠状病毒病和猫传染性腹膜炎病的病毒,分别设计针对猫细小病毒、猫疱疹病毒、冠状病毒基因的3对特异性引物,建立了同时检测以上三种病原的多重PCR方法,并对反应条件进行优化,测试多重PCR方法的特异性和灵敏度,对采自宠物医院的口咽拭子、粪便等病料进行检测,从66份样品中检出33份FPV阳性(阳性率50%),1份FHV-1阳性(阳性率1.5%),10份FCV阳性(阳性率15%),其中FPV和FCV混合感染9份(占比13.6%)。病毒的序列分析显示,上海浦东收集到的猫细小病毒分为两大分支,只有一例52号病例身上携带的猫细小病毒其基因序列与NCBI网站上下载数株参考株序列位于同一分支,其余病毒序列集中于另一分支;上海浦东收集到的唯一一例猫疱疹病毒序列与2018年在土耳其收集到的Tur/Kays58株遗传距离最近;上海浦东收集到的猫冠状病毒同样呈现出明显的序列相似性,同源性最近的参考株则是2018年在泰国收集到的THA-KU03株。

摘要：根据相关文献以及Gen Bank设计真菌的特异性引物,通过引物、退火温度及时间的优化,建立犬小孢子菌（Mc）、石膏样小孢子菌（Mg）和厚皮马拉色菌（Mp）的多重PCR检测方法,用于犬皮肤病病原真菌的快速检测。经特异性和灵敏性检测后,对浦东地区宠物医院采集到的38份疑似病例样品通过真菌培养后提取DNA进行检测。结果：所建立的多重PCR方法稳定性好,可有效区分3种常见的犬皮肤病原真菌,扩增出290 bp（Mc）、460 bp（Mg）和582 bp（Mp）的目的片段,最低检测限分别为4.1、2.0和5.1 pg/μL。检测的38份临床样品中,犬小孢子菌有7例,石膏样小孢子菌2例,马拉色菌2例,经测序均验证扩增正确。由此表明,本文建立的犬皮肤病常见病原真菌多重PCR检测方法为犬真菌性皮肤病的快速检测提供了技术支持。

摘要：为建立犬呼吸道冠状病毒(Canine respiratory coronavirus,CRCoV)、犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)3种病毒的多重PCR方法,根据GenBank中CRCoV、CPV和CDV的基因序列,进行BLAST同源性分析,找出保守序列,并根据保守序列对每个病毒设计引物,建立扩增3种病毒的多重PCR方法,并通过已建立的方法对收集的呼吸道病犬病料进行检测。结果表明,所建立的三重PCR体系组成为2×Taq Mix 12.5μL,3对上、下游引物各0.6μL,混合模板1μL,ddH 2 O 7.9μL;扩增程序为94℃5 min;94℃30 s,54℃1 min,72℃24 s,共35个循环;72℃8 min。该方法具有较高的灵敏性和特异性。临床验证实验表明,本实验所建立的多重PCR方法可用于临床诊断。

摘要：本文以城镇区域环境噪声为分析对象,运用BASIC语言对其计算过程进行了程序设计。