摘要：前言 聚合酶链反应或称多聚酶链反应(PolymeraseChain Reaction,PCR),是一种根据生物体内DNA复制的某些特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增新技术。该方法在体外数h内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增10~7～10~9倍,大大提高了DNA的得率。

摘要：为了能够快速、准确定量小鼠Bax基因的mRNA,构建了小鼠Bax基因的标准品质粒和标准曲线。根据GenBank中小鼠基因编码区保守序列,设计特异性引物,从N2a细胞中提取总RNA,利用RTPCR技术扩增该基因162bp的核苷酸片段,经纯化、连接和转化后,提取质粒并进行酶切、测序鉴定;将阳性重组质粒10倍递减稀释作为标准模板,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,建立了Bax标准曲线及直线回归方程。结果表明产物熔解曲线峰值单一,引物特异性高;标准曲线相关系数R2=0.999,表明线性关系好。本试验成功构建了目的基因Bax的标准品质粒和标准曲线。