摘要：目的构建16SrRNA基因多区域建库、测序及分析流程,验证其可行性,并初步应用于胃癌组织微生物组研究。方法依据细菌16SrRNA基因5个可变区外的保守区序列,设计相应引物,进行多重聚合酶链式反应(PCR)建库、测序。通过分析琼脂糖凝胶电泳图,评价不同引物的扩增效果,验证5对引物的敏感性以及16SrRNA基因多区域建库的可行性;将16SrRNA基因多区域测序法在微生物相对丰度已知的阳性对照样本中与传统单区域测序方法进行对比,并在胃癌石蜡组织与新鲜组织样本中比较该方法与传统单区域测序方法在不同生物学水平检出微生物数量和α多样性之间的差异。结果16SrRNA基因多区域测序方法能够在各生物学分类水平下检出阳性对照中的全部微生物。在3例胃癌石蜡组织和3例胃癌新鲜组织样本中的各生物学分类水平上检出的微生物数量均高于传统16SrRNA基因测序方法,P<0.01。在胃癌石蜡组织中,单区域V4测序和多区域测序的Shannon指数分别为1.18±0.12和3.08±0.09,t=21.29,P<0.01;Simpson指数分别为0.63±0.04和0.89±0.01,t=10.35,P<0.01;Chao1指数分别为14.67±3.21和199.67±22.50,t=14.10,P<0.01。在胃癌新鲜组织中,单区域V4测序和多区域测序的Shannon指数分别为0.68±0.68和2.88±0.40,t=4.79,P<0.01;Simpson指数分别为0.37±0.32和0.88±0.04,t=2.78,P<0.05;Chao1指数分别为3.33±3.21和115.83±31.95,t=6.07,P<0.01。结论基于16SrRNA基因测序技术,构建的16SrRNA基因多区域建库、测序及分析流程能够提高检测物种的分辨率,提高肿瘤组织中检出微生物的种群数目及多样性,为肿瘤微生物组研究提供了低成本、易操作的技术支撑。

摘要：进行二级可调增压柴油机热平衡性能研究,有助于评价发动机在不同工况下的热量分配情况,合理控制发动机热负荷,解决高海拔发动机开锅问题,提高热效率。利用自主设计的柴油机高海拔热平衡试验系统,进行不同模拟海拔(0、3500、5500 m)二级可调增压柴油机全负荷热平衡试验,研究了海拔高度对二级可调增压柴油机热平衡性能的影响。结果表明:随海拔升高,发动机热负荷升高,具体表现为高速区域涡前排温增大、1500 r/min全负荷工况下缸内最高燃烧温度峰值升高且对应曲轴转角减小;随海拔升高,有效功和排气带走热量占总热量百分比均呈下降趋势,发动机冷却液带走热量和余项损失占总热量百分比增加,相较于平原工况,海拔5500 m时,有效功率和排气散热量占比减小1.8%、16.8%,冷却液带走热量和余项损失占比增加2.9%、15.7%;二级增压技术对柴油机高原性能恢复具有明显效果,5500 m海拔环境条件下,柴油机中、高转速下的热效率恢复情况明显优于低速工况。