摘要：目的:建立一种快速、高效、可视化的细菌多黏菌素耐药基因mcr-1检测方法,为其基层检测的展开提供依据和便利。方法:利用重组酶聚合酶扩增结合胶体金侧向流试纸条技术(Recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow dipstick,RPA-LFD),辅以手持式胶体金读数仪;根据mcr-1基因保守序列设计合成一对特异性RPA引物,通过对反应条件和体系的优化,以及特异性试验、灵敏度试验、模拟食样试验和实际样品试验,成功建立了可视化定量检测细菌多黏菌素耐药基因mcr-1的RPA-LFD方法。结果:在引物浓度400 nmol/L,引物比例1:1时,该方法最佳反应条件为Mg^(2+)浓度14.0 mmol/L,反应温度37℃,反应时间20 min;灵敏度好,标准曲线方程为y=0.117x+0.051,定量限为10^(1)~108 copies/μL,检出限为10^(1)copies/μL,比PCR法低一个数量级且模拟样品检出结果与PCR法一致。利用建立的RPA-LFD法对猪肉样品、鸡肉样品、生猪养殖场环境样品、肉鸡养殖场环境样品、大肠杆菌分离株和弯曲肠杆菌分离株各15份中多黏菌素耐药基因mcr-1携带情况进行分析;RPA-LFD法与常规PCR法阳性样本检出率一致,共检出9份mcr-1基因阳性样品。RPA-LFD定量分析显示,阳性样品中mcr-1基因浓度在4.5×10^(2)~8.6×10^(4)copies/μL之间。结论:本研究建立的细菌多黏菌素耐药基因mcr-1的RPA-LFD检测法特异性强、灵敏性高、操作简单,可广泛应用于基层检验。

摘要：针对风机发电机机组遭受雷电过电压损坏和雷击损坏导致终端设备损坏的问题,基于电涌保护器(Surge Protection Device,SPD)多级保护设计理论,设计了风机发电机机组SPD。本研究使用8/20μs雷电流发生器对SPD进行冲击试验,同时分析不同SPD的压敏电压和不同长度的线缆SPD的冲击特性。得出结论:两级SPD的残压与冲击电压、SPD的压敏电压、线缆的长度呈现正相关;第一级SPD的残压比第二级的残压大,当入侵雷电过电压时,多级SPD的对过电压进行多级钳位,从而可以将电压限制在风机发电机组能够承受的电压范围;第一级的SPD泄放的通流和能量远大于第二级SPD泄放的通流和能量;多级SPD配合时,第一级SPD会泄放掉入侵的大量能量,剩余前进的能量将由第二级SPD进行再次泄放,从而可以更好保护后端的设备;增大线缆的长度虽然可以让更多能量在第一级SPD泄放,对后端的设备进行很好的保护,但是第一级SPD泄放过多的能量,会缩短第一级SPD的使用寿命,所以在设计时线缆长度的选择需要折中考虑。笔者对风机发电机机组SPD通过试验进行充分性的研究,对风机发电机机组SPDs在防雷应用中有一定参考价值意义。

摘要：针对强电磁脉冲对天线后端接收机造成损害的问题,本研究基于射频电路设计理论,利用理论与实验相结合的方法,通过理论计算设计出一个中心频率为2 450 MHz,带宽100 MHz,通带内插入损耗小于1.5 dB的微带线带通滤波器,并使用HFSS软件仿真并优化其性能,然后将浪涌防护器件与滤波器组合设计出强电脉冲防护电路,通过电路软件ADS(Advanced Design System)仿真防护电路的S参数,最后制作出实物进行测试。实验表明:设计的电磁脉冲防护装置在2 400~2 500 MHz频段内,插入损耗绝对值小于5 dB,回波损耗绝对值大于15 dB,冲击电流为500 A时,射频后端通流小于1.3 A,电流抑制比大于50 dB,能够在不影响天线正常工作的情况下,有效的泄放大电流。研究结果对天线的强电磁脉冲防护设计具有一定的参考价值。

摘要：“问题驱动”式教学法属于建构主义教学模式,就是把教学内容的知识点、语言点、能力点等进行信息加工,形成一个有序的问题链呈现给学生,学生思考问题、查阅资料、讨论探究,在教师的指导下,实现解决问题。即遵循着“尝试-错误-成功”的原则,一次次地提出假设,反复试验,直到解决疑难,得出正确结论的全过程。1问题教学法在医学文献检索课上应用的实践过程1.1教学实施过程及设计首先创设问题情境。创设问题情境是问题教学的开始,好的问题情境可以引起学生学习兴趣,把学生带入到学习的氛围中。

摘要：为了适应社会对药学类专业创新型人才的需求,近年来,对药学类专业无机化学实验课程中的设计性实验进行改革和探索,构建系统化、分层次的创新型设计性实验模式。通过设计性实验的开展可以提高学生的学习兴趣,培养学生全面发展的能力、以及锤炼学生创新思维和创新实践能力。分别从设计性实验的合理安排、实施开展以及评价机制三个方面进行探讨研究。

摘要：在分析医学生信息素养培养方式的基础上,介绍医学信息素养游戏教育法的设计流程以及如何将游戏教学融入到医学生信息素养培养教育之中,并对其预期效果进行描述。

摘要：本研究旨在分析热休克蛋白90(HSP90)基因的保守性,并为寻找新的HSP基因,探索HSP90的应用提供理论数据。利用CODEHOP设计简并引物,采用PCR方法克隆鲫鱼的HSP90序列,并将扩增的序列克隆到pMD18-T载体中构建克隆载体后进行测序,再将测序结果通过BLAST进行同源性比对并构建系统进化树。结果显示,鲫鱼与鲤鱼的同源性为99%;与斑马鱼的同源性为92%。本试验设计出的引物简并度较低,Tm值的修改较为灵活,产物特异性强,为研究鲫鱼的功能基因提供基础保障,并为热休克蛋白在进化上的保守性研究奠定理论基础。

摘要：本实验通过无性生殖的方法得到了花羔红点鲑肌钙蛋白(Tnc)基因,并在使用生物信息学资源和生物软件的条件下,通过CODEHOP的方法对特定的氨基酸序列设计简并引物,并对得出的结果进行同源性分析同时构建其相对系统进化树。结果表明:通过CODEHOP的方法所设计出的引物简并度较其他方法得到的引物简并度低,DNA熔解温度(Tm值)修改较方便,产物具有较强的特异性;肌钙蛋白具有高度的保守性,将肌钙蛋白基因片断做结果比对,其编码的氨基酸序列与斑马鱼同源性可达96%,与大西洋鲑Salmo salar同源性为92%,白斑狗鱼Esoxlucius同源性为92%,虹鳟Oncorhynchus mykiss同源性为91%,斜带石斑鱼Epinepheluscoioides同源性为91%,斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus同源性为85%。

摘要：药学综合实验是基于创新药物研发思路,围绕创新药物研发过程,培养综合性药学人才的重要途径。以药学综合实验中硬胶囊剂的制备与质量评价实验为例,从实验内容的选择、教学目标的确定、教学过程如何执行等方面进行教学设计,采用以教师辅助学生自主实验的方式,充分调动学生学习的积极性,有效提高学生的实验操作能力、科研能力。

摘要：为快速分离鉴定鲫鱼出血性败血症致病因子,从病死鲫鱼肝脏分离细菌,经LB固体培养基划线分离,28℃,24 h培养后,见圆润光滑、表面微凸的菌株呈优势生长,挑取单菌落命名为AX002。观察该菌在RYAN培养基28℃,24 h后生长成深绿色有深核菌落,同条件在RS培养基培养,24 h后长成黄色菌落,后逐步由内向外变为绿色菌落,通过全自动细菌鉴定系统,检测AX002对蔗糖等23种指标呈阳性反应,对山梨醇等22种指标呈阴性反应。设计引物扩增16S r DNA和促旋酶亚基(gyr B)基因并测序。测序结果与NCBI中其他菌株序列进行比对,建立系统发育树,确定AX002为维氏气单胞菌。同时该系统显示该菌对阿米卡星、头孢唑啉、复方新诺明、环丙沙星等15种抗生素敏感。该菌对头孢唑啉、氨苄西林和氨苄西林舒巴坦钠三中抗生素药物最低抑菌浓度>16μg/m L,对四环素最低抑菌浓度>8μg/m L,结果判定AX002对头孢唑啉、氨苄西林、氨苄西林舒巴坦钠和四环素具有耐药性。该菌对体长5~15 cm,体重30~50 g鲫鱼腹腔注射,测定半致死浓度(LD50)为2.38×107CFU/m L。本研究有利于进一步研究维氏气单胞菌。