摘要：《工程力学》课程是机械类专业重要的必修课程,具有力学基础与工程实践相结合的特点,是连接基础课程与专业课程的重要桥梁。针对目前力学课程授课过程中的“痛点”问题进行分析,结合课程教学反馈进行课程的创新设计,采用工程案例引入课程、学科竞赛辅助教学、科研进课堂等方式提升课程的创新性、高阶性和挑战度。通过课程考核和教学反馈数据可得,本次课程的改革对于提高学生的力学学习兴趣、提高课程教学效果有显著作用。

摘要：提出并实现了一种集开关控制、拉力测试和深度测试三种功能于一体的定深测控系统,着重介绍了系统结构、功能及软件实现。系统采用定深测控装置完成数据的精确采集及开关控制要求,利用终端数据处理软件处理回收的数据,图形化显示拉力、深度的变化曲线。运行结果表明:系统工作可靠,具有很好的效果。

摘要：目的构建smad2特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,并检测肿瘤细胞中其对smad2基因表达的干扰效果。方法根据smad2基因序列设计合理的smad2 siRNA,并将合成的寡核苷酸序列克隆到pSliencer 2.1-U6 neo载体中,转化大肠杆菌DH5α;挑取阳性菌落进行质粒酶切和序列分析;将构建正确的smad2 siRNA重组质粒转染,或与带Flag标签的smads真核表达载体共同转染293T细胞或HeLa细胞,收集细胞裂解物,Westem印迹检测siRNA的干扰效果。结果正确构建了smad2 siRNA重组质粒,对smad2表达的特异性干扰效果可达70%以上。结论成功构建了smad2 siRNA载体,为进一步探讨smad2在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。

摘要：旨在对人白细胞介素-4(hIL-4)上、下游序列进行优化设计,提高在原核系统中的表达量,并对表达的包涵体进行复性研究提高复性率。利用B ioSun的RNA二级结构预测模块辅助设计hIL-4起始密码子(AUG)上、下游的序列,使局部二级结构的自由能满足高表达要求;根据pBV220载体和原核系统的特点优化引物序列提高hIL-4原核表达量。优化hIL-4包涵体复性条件和方法,提高复性率和生物活性。结果显示,成功构建了pBV220/hIL-4高效表达载体,原核表达的重组人IL-4占细菌总蛋白的35%以上,明显高于优化前表达量;经过复性研究hIL-4包涵体复性率可达到15%以上,生物活性鉴定发现,纯化的hhIL-4蛋白的比活等同或高于国外同类产品。影响原核表达的条件较多,对表达序列的优化设计可以大大提高蛋白的表达量。针对人IL-4基因序列的优化设计提高了人IL-4基因的表达,复性方法的改良提高了复性率和生物活性。

摘要：目的构建结核分枝杆菌PPE19的GST融合蛋白表达载体,并鉴定其在大肠杆菌中的表达。方法以结核杆菌H37Rv基因组为模板,根据PPE19基因序列设计引物,运用PCR的方法获得PPE19基因,并将其克隆到pGEX-kg载体中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性菌落进行质粒的酶切和序列分析;将构建正确的克隆进行诱导表达,对菌体裂解物进行SDS-PAGE分析;用western-blot鉴定融合蛋白的表达。结果正确构建了pGEX-PPE19原核表达载体,载体上基因序列正确;载体能在大肠杆菌中表达分子量约为70 kDa的重组蛋白;该蛋白能与GST抗体结合。结论成功构建了GST-PPE19融合蛋白的表达载体,为进一步进行PPE19蛋白的功能研究奠定了基础。

摘要：目的:设计并构建人eya2(eyes absent2)基因小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,并观察其沉默效果。方法:以人eya2为靶基因,以pSliencer2.1-U6neo质粒为载体,根据人eya2的cDNA序列,设计含有小发卡结构的2条寡核苷酸序列,将其克隆到siRNA表达载体上;转化大肠杆菌DH5α菌株,抽提质粒,测序分析;将重组质粒转染人胚肾293T细胞,通过荧光分析、Western blot和转录活性实验检测其抑制效果。结果:重组体测序结果与目的序列相一致,证明构建了eya2 siRNA真核表达载体;荧光观察表明siRNA能显著减弱细胞中绿色荧光强度,抑制eya2基因表达;Western blot分析证明构建的siRNA能有效抑制外源性及内源性eya2基因表达;转录活性测定表明,构建的siRNA能有效抑制eya2基因表达。结论:构建了eya2 siRNA真核表达载体,该siRNA能有效地抑制eya2基因表达。