摘要：为提高咖啡果皮原花青素的提取率,采用响应面法对咖啡果皮中原花青素提取工艺进行优化。通过改变不同单因素,分析不同因素对咖啡果皮中原花青素提取率的实验数据并找到最佳的单因素。然后,依据中心组合实验的设计原理,利用四个因素三个水平的响应面分析法,分析了四个因子(提取温度、提取溶剂及其浓度、固液比和提取时间)对咖啡果皮原花青素提取率影响的显著性和交互作用。根据实验分析结果得:咖啡果皮中原花青素提取的最佳提取条件为:提取溶剂及其浓度:乙醇,浓度80%;提取温度:100℃;提取时间:50分钟;固液比:1:69.97(g/ml);理论提取率:30.099mg/g。在此条件下,检验实验实际值为30.086mg/g,与理论值误差为0.04%。

摘要：目的探讨紫云英苷(AG)联合高压氧(HBO)处理对肺腺癌A549细胞增殖能力的影响及其作用机制。方法A549细胞培养完成后,采用CCK-8法检测其细胞活性,选择100μmol/L为A549细胞的AG作用浓度(IC 50)。按照实验设计分为对照组、AG组、HBO组和AG+HBO组。对照组正常培养;AG组使用100μmol/L AG培养48 h;HBO组将A549细胞用HBO处理2次;AG+HBO组使用100μmol/L AG培养48 h后,再予以HBO处理2次。CCK-8法检测A549细胞增殖能力;平板克隆实验检测A549细胞克隆形成情况。Western blotting实验检测A549细胞P13K/AKT信号通路蛋白的表达水平。结果CCK-8法检测结果显示,AG+HBO组A549细胞相对增殖能力相较于其他3组明显降低(P<0.05)。A549细胞在培养2周后,平板克隆实验检测结果显示,AG+HBO组A549细胞克隆形成率[(28.182±5.982)%]明显低于对照组[(70.182±8.511)%]、AG组[(37.545±3.871)%]明显低于HBO组[(67.182±7.982)%],差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与其他3组比较,AG+HBO组A549细胞P13K/AKT蛋白相对表达量均明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论HBO能够提高A549细胞对AG的药物敏感性,其机制是通过下调P13K、AKT的表达,抑制A549细胞的增殖能力。

摘要：目的探讨高压氧(HBO)辅助长春瑞滨(NVB)处理对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法人非小细胞肺癌A549细胞培养完成后,按照实验设计分为NVB组和HBO+NVB组,NVB组予以50μmol/L(IC 50浓度)NVB处理,HBO+NVB组予以50μmol/L NVB处理后再用0.2 MPa HBO处理。分别于24、48、72 h利用CCK-8实验检测2组肺癌A549细胞增殖能力;处理72 h后采用Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blotting实验检测A549细胞增殖、迁移和侵袭相关蛋白的表达水平。结果HBO+NVB组肺癌A549细胞OTX1 mRNA表达水平明显低于NVB组(P<0.05)。HBO+NVB组肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力明显低于NVB组(P<0.05)。HBO+NVB组肺癌A549细胞增殖相关蛋白MMPs、VEGF表达水平明显低于NVB组(P<0.05)。HBO+NVB组肺癌A549细胞迁移和侵袭相关蛋白E-cadherin表达水平明显升高,N-cadherin表达水平明显降低(P<0.05)。结论高压氧通过下调OTX1基因表达NVB抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力。