摘要：双生病毒是一类具有孪生颗粒形态的植物单链病毒，目前双生病毒病害已在多个国家和地区的作物上造成严重危害。近年来，我国多省报道作物上有这类病毒的发生，且有逐年加重和扩散的趋势。根据危害番茄的双生病毒DNA-A序列保守区设计简并引物，对2009年4月采自河北省魏县表现叶片黄化、曲叶症状的4个番茄样品进行PCR检测，均为双生病毒阳性，对样品的扩增片断进行了克隆测序，经序列比对分析，与番茄黄化曲叶病毒（Tomato leaf curl virus，TYLCV）山东分离物（FJ646611．1）序列相似性为99．25％～99．55％，说明河北番茄黄化曲叶病由TYLCV引起。

摘要：为快速准确地鉴定出2种不同的葡萄溃疡病菌——葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea和小新壳梭孢Neofusicoccum parvum,根据Gen Bank中已报道的引起我国葡萄溃疡病的6个主要种的延伸因子-1序列及β-微管蛋白序列分别设计了葡萄座腔菌和小新壳梭孢的特异性引物B.d-F/B.d-R及N.p-F/N.p-R,建立了双重PCR检测方法,并对田间病样进行检测。结果表明,引物B.d-F/B.d-R和N.p-F/N.p-R可以分别在葡萄座腔菌和小新壳梭孢中扩增到324 bp和212 bp的特异性条带,检测灵敏度均为10 pg。双重PCR检测体系中Taq DNA聚合酶的最佳用量为0.05 U/μL,引物B.d-F/B.d-R和N.p-F/N.p-R的最佳终浓度均为0.2μmol/L,最适退火温度和退火时间分别为58℃和30 s。对田间葡萄病样的检测结果与室内病样常规病原菌分离结果一致。表明该双重PCR检测方法能够同时检测葡萄座腔菌和小新壳梭孢,有助于快速、灵敏地检测葡萄苗木的带菌情况。