摘要：目的克隆表达白纹伊蚊唾液腺34ku-1蛋白(Aalb_34 ku-1),并制备鼠抗34ku-1多克隆抗体,用于蚊唾液34ku-1蛋白的检测。方法根据白纹伊蚊罗马株(GenBank:AY826117.1)34ku去除信号肽后的基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR技术从白纹伊蚊安顺株雌蚊体内扩增获得34ku-1基因。利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)、瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASy)等对该蛋白进行生物信息学分析。将该基因构建到原核表达质粒pET-32a(+)中,转染大肠埃希菌BL21(DE3)后经异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析表达结果。镍柱纯化34ku-1重组蛋白,采用Western blot验证纯化蛋白的免疫反应性。用纯化的34ku-1重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备免疫血清,采用间接ELISA法检测血清抗体效价,采用Western blot方法对抗体的特异性进行鉴定。收集雌蚊唾液,采用Western blot方法用制备的多克隆抗体检测蚊唾液34ku-1蛋白。结果成功克隆获得34ku-1基因,生物信息学分析该基因全长888 bp,编码295个氨基酸。编码蛋白的理论分子质量单位为33.6 ku,等电点为5.54。重组质粒pET-32a(+)-34ku-1经PCR、双酶切及测序验证构建正确。经IPTG诱导的BL21重组菌表达产物主要以包涵体形式存在。经亲和层析法获得高纯度的34ku-1重组蛋白,浓度为0.71 mg/mL。Western blot显示重组蛋白可被抗6-His tag抗体识别,制备的鼠抗34ku-1血清抗体效价为1∶625000,且特异性良好,用34ku-1多克隆抗体Western blot可检测到蚊虫唾液中的34ku-1蛋白。结论成功克隆并表达了白纹伊蚊34ku-1原核蛋白,制备了高效价、高特异性的鼠抗34ku-1多克隆抗体,应用该抗体可检测到雌蚊唾液中的34ku-1蛋白。

摘要：目的建立检测人呼吸道合胞病毒(human Respiratory Syncytial Virus, hRSV)实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)绝对定量检测法。方法提取人呼吸道合胞病毒mRNA并逆转录为cDNA,以cDNA为模板,用hRSV的N基因作为目的基因设计的引物进行PCR扩增,扩增产物连接到pMDTM 18-T载体,构建标准检测质粒。以构建的标准检测质粒进行qRT-PCR,建立绝对定量检测的标准曲线。结果 PCR扩增获得714 bp产物,与pMDTM 18-T载体连接构建的标准检测质粒测序验证成功。qRT-PCR检测目的基因扩增效率E为105.2%,R^2=0.998,在1.0×10^2~1.0×10^8拷贝范围内具良好线性关系,最低检测限为100拷贝/反应。结论成功建立了hRSV qRT-PCR绝对定量检测法,该方法快速、特异、灵敏,为hRSV诊断试剂盒的研制奠定了基础。

摘要：针对片上Gm-C滤波器的自动频率调谐电路结构复杂、功耗大和精度低的问题,提出了一种精确的恒定跨导偏置电路.该电路通过使跨导管的跨导恒等于片外高精度电阻来稳定滤波器截止频率.给出了电路的推导,设计了滤波器及跨导器.将此电路应用于无线传感器网络节点芯片中九阶低通滤波器,进行了仿真;基于SMIC中0.18μm、1.8 V的1P6M CMOS工艺,采用无源LC滤波器原型综合的方法实现滤波器,并完成测试.结果表明,该滤波器的截止频率与设计值相差仅为1%,带内纹波小于0.8 dB,输入噪声电压小于25 nV/Hz～(1/2),功耗仅为1.6 mW,满足无线传感器网络节点芯片的要求.

摘要：在Linux内核(2.6.35.4)中对IEEE802.11s协议进行设计与实现,包括其在内核中的位置、组织结构、设计特点、主要功能、与其他各层的互操作、work_queue内核机制在其实现中的应用等。分别针对IEEE802.11s的不同功能模块阐述其设计思路和工作流程,并对其关键实现部分的数据结构和函数进行介绍和分析。

摘要：在铝合金、钛合金及高温合金等金属零部件中通常会应用到选择性激光熔覆技术(SLM),利用该项技术所生产的医疗器械试件可发挥较高的机械性能以及生物相容性,同时还可发挥个性化设计优势,在口腔修复中具有重要作用。了解影响其成形质量的因素,主要有激光光斑、扫描方式、刮板特征、粉末特征、选区预热以及激光能量密度。另外,SLM技术在金属基底冠制作、可摘义齿支架制作以及种植基台制作方面有一定应用,在制作口腔修复体方面具有一定作用。

摘要：在使用混合无线网状网协议(hybrid wireless mesh protocol,HWMP)的IEEE802.11s树状网络中,子节点之间通过洪泛PREQ(path request)来维护路由,会带来严重的PREQ广播风暴问题。为了解决这个问题提出了一种限制TTL(time to live)的PREQ广播风暴抑制方案。该方案设计了一种子节点分级策略:利用HWMP的表驱动路由,根据子节点到根节点的路由跳数将子节点分级,并在网络中同步等级信息。源节点在发送PREQ时不再使用HWMP默认的TTL,而是将PREQ的TTL设置为源节点与目的节点的等级和。理论分析和实验结果表明,该方案限制了PREQ的传输距离,在节点位置固定的静态树状网络中,当源节点与目的节点的等级和不大时该方案在路由开销、回路时延、丢包率和吞吐量上的性能表现都优于HWMP。

摘要：传统的灌浆工程设计方法日益无法满足工程建设信息化发展需要。为实现灌浆工程的直观显示、快速表达及智能化建设,提出采用“整体-局部-整体”的思路建立灌浆工程参数化设计模型,即先将灌浆工程系统分解为单个灌浆孔并编码;再对每一个灌浆孔分别构建几何模型,并添加灌浆工艺属性特征;最后集成灌浆参数化设计模型。通过分析单个灌浆孔结构特点、设计及施工要求,提出采用孔口坐标等8个参数表示灌浆孔几何特征,采用灌浆方法等10个参数表示灌浆工艺属性,并研究了各参数的获取方法。将该方法应用于金沙江乌东德水电站灌浆工程,实现了灌浆工程三维可视化,提高了乌东德灌浆工程建设的智能化水平。相关经验可供类似工程借鉴。

摘要：设计了一种应用于无线传感器网络(WSNs),可以在1.2 V电压工作的,全集成接收信号强度指示器(RSSI)。介绍了对数放大器的基本原理,改进了直流偏移消除电路结构,利用隔级反馈使限幅放大器部分更加易于全集成。改进了全波整流电路,使其能工作在低电压,功耗更低,同时大大提高了工艺稳定性和温度稳定性。采用0.18μm CMOS工艺,仿真结果显示:在1.2V电源电压时,RSSI的直流电流小于0.6 mA,2 MHz输入信号频率,输入动态范围为-85～-10 dBm时,RSSI的线性误差小于±0.5 dB。

摘要：当前我国进入到新时代的发展时期,水利工程也成为城市建设中非常重要的基础工程项目,它与我国的农业生产和人们的生活之间具有紧密的联系。通过加强对水利工程防渗施工的设计,保证工程的整体使用效果、延长工程的使用寿命,防止各种安全隐患的发生。对于水利工程的建设具有非常重要的影响,在水利工程防渗技术应用的过程中需要从其重要性以及具体渗漏原因着手,合理的采取防渗施工技术,保证整个水利工程的防渗施工效果。

摘要：为了提高混合无线网状网协议(hybrid wireless mesh protocol,HWMP)在工程应用中的鲁棒性,研究了Linux内核中的HWMP序列号机制。发现了由于"序列号有效"域在路由更新流程中处理不当引起的路径请求(path request,PREQ)死锁环问题,提出了删除"序列号有效"域的解决方案。该方案改变了HWMP的路由更新流程,消除了PREQ错误转发,进而消除了PREQ死锁环。在Linux内核中实现了该方案并进行了长时间的测试,表明了该方案的可行性和有效性。