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烟草ISSR-PCR反应体系优化的初实验: 收藏
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引用; 《农业研究与应用》2018年第3期31卷 19-22页; 作者：覃剑峰何江王新钧王东贤王卫峰陈涛覃旭崔明勇黄显雅杨祥燕彭欣怡广西壮族自治区亚热带作物研究所广西南宁530001 中国烟草总公司广西壮族自治区公司烟叶处广西南宁530001; 为了探索建立烟草的ISSR-PCR最适反应体系,用单因素设计方法对影响ISSR-PCR反应体系的主要影响因素进行优化筛选。结果表明,烟草的最适反应体系为:反应总体积为20μL:2.00μL10×buffer,50ng(1μL)模板DNA,Taq聚合酶的用量为4U(0.8...; 为了探索建立烟草的ISSR-PCR最适反应体系,用单因素设计方法对影响ISSR-PCR反应体系的主要影响因素进行优化筛选。结果表明,烟草的最适反应体系为:反应总体积为20μL:2.00μL10×buffer,50ng(1μL)模板DNA,Taq聚合酶的用量为4U(0.8μL),0.6μmol/L(1.2μL)引物,0.75 mmol/L(0.6μL)Mg2+,0.3 mmol/L(2.4μL)d NTP,dd H2O12μL,退火温度为52℃。用筛选的引物对36份烟草种质分别进行PCR扩增,扩增条带清晰,清晰度和多态性都较好,可以认为该反应体系对烟草种质具有较好的可靠性和稳定性。; 来源：详细信息评论

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