摘要：通过对现有研究成果的分析与实证调查发现,高职院校学生学习存在诸多问题,具体表现为:学生整体学习情况欠佳,学习结果处于一般水平;学生的学习投入无法催生自信与认同,学业倦怠现象较为严重,且受群体影响较大;学生多进行表层学习,学校、家庭等形成的教育环境尚未形成足够支持。基于此,提出深度参与学习的理念,具体包括引导学生深度介入学习目标的确立、学习过程的设计与学习结果的评价。

摘要：云计算技术在农机物联网应用中要同时考虑公、私两种不同类型的云,最大限度的实现云资源间优势互助共享。基于现有技术,组建混合云,实现核心业务服务的高水平容灾和扩展性,保障服务的连续性,设计搭建“高可用、高性能、低成本、易维护的”的混合云应用平台目标。本文首先介绍了行业应用的需求驱动,然后针对需求从公有云产品特点、优势分析、资源协作、私有云目标及方案设计、混合云的基础设施层、应用层设计组建等方面进行了分析,阐述了设计的特点,并在实际环境中进行了验证,最后对实际应用中部署设计原则做了建议。

摘要：为了确定并优化纯中药、无添加蒲公香薷饮凉茶配方并评价其抗氧化性,在单因素试验基础上,以感官评价和抗氧化性强弱为指标,采用星点法设计三因素五水平实验,并运用Design-Expert V8.0.6对蒲公英、槐米、香薷、白扁豆、山楂和甜叶菊的配比进行优化,得到日最佳配方为:蒲公英20.70 g,槐米5.18 g,香薷5.30 g,白扁豆10.60 g,山楂9.00 g,甜叶菊10.18 g。经验证,感官评分(94.33±1.52)较高,DPPH·清除能力(57.7±1.20)%和ABTS+·清除能力(73.076±1.38)%较强,实测值与预测值相差小。结论:准确地优化了蒲公香薷饮凉茶处方组成,为接下来工艺优化研究奠定了基础;同时,以此制得凉茶色泽佳,无添加,清香、口感甘甜、纯正,略有淡淡的山楂酸味,抗氧化能力强,且不伤脾胃,为凉茶市场注入了活力。

摘要：目的建立3种用于检测G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因的一步法实时逆转录PCR,用于本实验室G1、G2和G4型轮状病毒的快速检测和定量、定性分析。方法设计G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因特异性引物和探针,采用G1、G2和G4型轮状病毒特异性体外转录RNAs,建立实时逆转录PCR,特异性检测G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因方法。结果 3种实时逆转录PCR标准曲线R^2均大于0.99,扩增效率均在90%～110%之间。不同浓度体外转录RNAs重复性检测结果 CV均<5%,且可以对单拷贝RNAs样本进行检测。结论本检测方法快速、灵敏且重复性好,可以对轮状病毒VP7基因进行特异而有效的检测,为实验室轮状病毒毒株的分型和定量检测提供了特异而有效的检测方法,也为今后多重实时逆转录PCR的建立奠定了试验基础。

摘要：目的利用TaqMan实时荧光RT-PCR(real-time RT-PCR)技术建立测定人3型副流感病毒培养物滴度的方法。方法根据人3型副流感病毒HN基因的保守序列设计引物及探针,采用10倍系列稀释的体外转录HN RNA为模板,建立定量标准曲线。验证方法的专属性、敏感性、重复性,并对人3型副流感病毒的病毒培养液滴度进行检测。结果建立的方法对HN RNA标准品的检出灵敏度为4.7 copies/μL,标准曲线相关系数为0.998,扩增效率为105%。标准品的实验内重复性CV均<0.50%,实验间重复性CV<3.60%。系列稀释HNRNA标准品在低温(-80℃)下保存3年后,所测标准曲线的斜率和截距差异均无统计学意义(P=0.673)。用该方法对人3型副流感病毒分离株LZ17、LZ1501和LZ1728进行检测,结果均为阳性,3个病毒分离株滴度检测重复性CV均<10.00%;对7种呼吸道非人3型副流感病毒病原体检测均为阴性,表明该方法具有很高的专属性、敏感性和重复性。结论建立的TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确地对人3型副流感病毒滴度进行检测。

摘要：目的:对多重实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)进行反应体系筛选和方法探索,使其用于G1—G4型轮状病毒VP7基因的快速分型和定量分析。方法:设计G1—G4型轮状病毒VP7基因特异性引物和探针,以特异性体外转录RNA为模板,筛选多重qPCR反应体系,建立多重qPCR方法。采用单因素方差分析和配对样本t检验对多重与单重qPCR检测结果进行比较。结果:经筛选,得到6组三重qPCR反应体系和1组四重qPCR反应体系。所建立的三重和四重qPCR中,除四重qPCR的G1型参数〔标准曲线决定系数(R2)为0.982、扩增效率为89.221%〕略低于要求外,其余标准曲线R2均>0.99,扩增效率均在90%至110%之间;检测灵敏度达102拷贝/μl。多重与单重qPCR检测同一样本的相关性较好(R2>0.95)。三重与单重qPCR(t值为1.420~25.786)、四重与单重qPCR(t值为2.505~4.851)检测结果间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论:建立的多重qPCR可同时对3种以上目的基因进行分型和定量检测,为未来多价轮状病毒疫苗及混合病毒样本中毒株的快速分型和定量检测方法的建立提供了借鉴。