摘要：目的 :筛选出反应体系的最佳优化方案及最佳扩增条件 ,用于铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA分析 (RAPD)。方法 :应用单因素设计和反应曲面设计进行RAPD反应体系的优化 ,同时比较不同的退火温度、延伸温度及热循环仪类型对RAPD指纹图的影响。结果 :单因素设计明显受到多因素间交互作用的影响 ,从而使优化的反应体系具有多样性 ;反应曲面设计得出相对稳定的优化反应体系 (关键成分浓度 )为 :Mg2 + 2 .0mmol/L、引物 0 .5 μmol/L和模板 0 .5ng/μl。退火温度以38～ 4 3℃、延伸温度以 62～ 72℃为最佳。结论 :反应曲面设计是优化RAPD反应体系的最佳方案。扩增条件中退火和延伸温度分别以 38～ 4 3℃和 62～

摘要：2020年2月4日,北京冬奥会正式迎来倒计时两周年。在2019年,北京冬奥会吉祥物发布,赛会志愿者招募启动,京张高铁开通等一系列大事完成。2020年,北京冬奥会大部分竞赛场馆将达到测试赛要求,冬奥口号、奖牌和火炬设计方案将陆续征集,火炬传递路线和冬奥主题歌曲将发布,备受关注的开闭幕式正组建创意团队……

摘要：近年来,树突状细胞(dendritic cells, DC)作为抗原提呈能力最强的、也是惟一能激活初始型T细胞的专职抗原提呈细胞(antigen presenting cell, APC),已成为肿瘤生物治疗领域备受关注的焦点之一.

摘要：目的　筛选出反应体系的最佳优化方案用于绿脓假单胞菌的随机扩增多态性DNA分析 (RAPD)。方法　应用单因素设计和反应曲面设计 (RSD)进行RAPD反应体系的优化。结果　单因素设计受多因素间交互作用的影响 ,从而使优化的反应体系具有多样性 ;RSD得出稳定性良好的优化反应体系 (关键成分浓度 )为镁离子 2 .0mmol/L、引物 0 .5 μmol/L和模板 0 .5ng/μl。 结论　优化RAPD反应体系 ,RSD方案比单因素设计更简易、科学。

摘要：通过正交设计实验综合分析了内充羟丙基甲基纤维素（ＨＰＭＣ）无胶筛分毛细管电泳中的分离场强、ＨＰＭＣ浓度、柱长度和柱内径对核酸分离的影响。结果表明，柱长度越长、柱内径越小、分离场强越小，分离效果越好。考虑实际情况，为能在短时间内使几百个碱基对的核酸得到有效分离，一般选择３７ｃｍ×７５μｍｉ．ｄ．的涂壁毛细管、柱内质量浓度为８ｇ／Ｌ的ＨＰＭＣ、场强为３２４Ｖ／ｃｍ的条件，并在此种条件下分析了ＡｐｏＢ１００基因的低浓度聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增产物（７１０ｂｐ）。采用ＰＣＲ扩增体系作为阴性对照的方法，对未经任何纯化处理的ＰＣＲ扩增产物直接进样，可进行定性测定。

摘要：采用均匀设计法进行未涂壁石英毛细管等电聚焦研究，考察两性电解质、甲基纤维素、四甲基乙二胺和牛磺酸几种组分对等电聚焦的影响，确定出了比较合适的浓度范围。当中性蛋白质迁移通过检测窗后，在进样端施加一低气压，从而使酸性蛋白质得到很好的分离，适用于较宽的ｐＩ范围。方法的重复性好，为蛋白质分离鉴定提供一种有力的工具。

摘要：目的　研究乳糖化多聚赖氨酸 (Gal PLL)导向反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒 (HBV)基因表达的特异性抑制作用。方法　根据聚合酶链反应 (PCR)产物直接测序结果 ,在HBVU5样序列区合成了一段 16聚硫代磷酸反义寡核苷酸 ,并将其与肝靶向配体Gal PLL连接 ,在 2 2 15细胞比较 ,观察了它们对HBV基因表达的影响。结果　通过测序确定了 2 2 15细胞中HBVDNA属于HBV表面抗原ayw1亚型 ,并将此用于反义寡核苷酸的序列设计 ;经荧光组化分析表明 ,Gal PLL对大鼠肝组织有选择性亲和力 ;Gal PLL与DNA形成复合物的最佳摩尔比为 2∶1;在相同实验条件下 ,硫代磷酸反义寡核苷酸对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为 70 %和 5 8% ,而Gal PLL硫代磷酸反义寡核苷酸对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为 96 %和 82 % ,同时培养上清液和细胞中HBVDNA的含量明显下降 ,无关序列寡核酸无明显效果 ,寡核苷酸对细胞未产生毒性。结论　肝靶向配体和反义寡核酸的复合物可以通过无唾液酸糖蛋白受体靶入 2 2 15细胞内 。

摘要：目的 :将编码血红蛋白α99,β82 位Lys的密码子突变为编码Cys的密码子。方法 :将待突变的目的基因克隆到 pALTER Ex2载体上 ,采用寡核苷酸介导的定点突变进行突变。 结果 :初步筛选得到的克隆经序列测定表明 ,达到预期设计的目的 ,未发生意外突变。结论

摘要：目的探讨反义寡核苷酸（ＡＳＯＮ）特异性抗病毒作用。方法在ＨｅｐＧ２２．２．１５细胞中观察了４段１６聚针对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因不同功能区的ＡＳＯＮ对病毒复制的抑制作用。结果ＡＳＯＮ能显著抑制ＨＢＶ基因的抗原表达（Ｐ＜０．００１），在Ｓ基因区设计的ＡＳＯＮ对ＨＢｓＡｇ的抑制作用明显优于Ｃ基因区的ＡＳＯＮ（Ｐ＜０．０５）。反之，在Ｃ基因区设计的ＡＳＯＮ对ＨＢｅＡｇ的抑制作用又明显优于Ｓ和Ｐｒｅ－Ｓ２基因区的ＡＳＯＮ（Ｐ＜０．０１）。４段ＡＳＯＮ的联合用药并不能增强其对ＨＢＶ的抑制作用。结论ＡＳＯＮ可能成为一种有开发潜力的抗病毒药物。

摘要：根据乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的Ｓ区序列设计了３条引物：ＨＢＳ１（ｗ－／ｒ＋）、ＨＢＳ２（ｄ＋／ｙ－）和ＨＢＳ３，与ＨＢＳ１和ＨＢＳ２配对，经２次聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增。即可在检测有无ＨＢＶ－ＤＮＡ存在的同时对其基因型分类，可检出１０ａｇ的ＨＢＶ－ＤＮＡ，比免疫学方法更灵敏和特异。２５份不同亚型的标准血清中的绝大多数用Ｓ－ＰＣＲ和ＡＧＩＤ／ＲＰＨＡ的分型结果一致，Ｓ－ＰＣＲ的另一突出优越性在于能够对ＨＢｓＡｇ低滴度和阴性标本分型。