摘要：通过NCBI比对DAS-68416-4、DAS-44406-6、DAS-81419-2、SOYA 305423转基因大豆的序列同源性,在种属特异性区域设计多重引物和特异性荧光探针,同时提取基因组DNA,对退火温度和引物探针浓度进行优化,确定最佳反应程序,建立同时检测4种转基因大豆的多重实时荧光PCR方法。并对建立的实时荧光PCR反应进行特异性,重复性、灵敏性和适用性等方法学进行验证。结果表明DAS-68416-4、DAS-44406-6、DAS-81419-2、DP305423靶标序列的线性回归方程分别为y=-3.1524x+36.958,y=-3.1689x+38.828,y=-3.469x+37.933和y=-3.4839x+39.644;相关系数R 2分别为0.994、0.997、0.995和0.992;扩增效率分别为107%、106%、94.2%和93.7%,检出限可达9个拷贝,方法特异性强,重现性好,灵敏度高,是一种快速、经济、实用的检测方法,可对转基因大豆品系及其转化体成分进行大批量快速鉴定。

摘要：三集文献纪录片《信仰》已经在中央电视台播出,这是一部在整体风格与思路上有别于大多数文献纪录片,它对所有主创人员的艺术要求是要做到＂有情有义有力量＂。在前期创作过程中,曾举行过无数次的讨论会。在最后一次讨论会上,中央组织部的有关领导和中央电视台的相关领导特别强调了这部片子的总基调：一定要有别于以往的主旋律文献片,不要僵化,不要模式化处理,不要有说教式情绪,一定要用最真实的＂情义＂去打动观众。

摘要：本研究依据GB 4789.4-2016标准对沙门氏菌ACAS-PT526能力验证样品进行常规培养法检测,同时使用Taq Man实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对预增菌培养物进行快速检测和鉴定。本研究首先以沙门氏菌特异性基因hut基因为靶基因,设计合成特异性引物和探针,提取各类食源性菌种的核酸DNA进行实时荧光PCR反应,仅沙门氏菌属出现阳性扩增,非沙门氏菌属、阴性对照和空白对照均无扩增信号,验证设计合成的引物探针具有较高的特异性。其次将能力验证样品和加标样品经预增菌、增菌、分离、纯化、生化试验和血清学鉴定,同时将预增菌培养物经实时荧光PCR测定后,18-D319和加标样品有显著的S型扩增曲线,Ct值分别为24.34和26.21,为沙门氏菌阳性,18-M906无显著荧光信号,Ct值>40.00,为沙门氏菌阴性。经API20E试剂条鉴定,18-D319为猪霍乱沙门菌亚利桑那亚种,鉴定百分率为99.90%,T值为0.97,18-M906为大肠埃希氏菌,鉴定百分率为99.80%,T值为0.94。实时荧光PCR检测结果与常规培养法检测结果一致,且更为简单快速,从预增菌到结果判定仅需12h,结果准确度高,一批次可检测多个样品,可用于大量样品中沙门氏菌的快速筛查和对能力验证样品的检测验证。

摘要：车辆制动工况非常复杂,车辆动力学模型几乎不可能精确建立,用经典控制理论实现自动控制很难达到较好的效果。为此,采用模糊控制理论,利用模糊控制的推理方法,构造理想的模糊控制器。该控制器使得车辆在不同的环境条件下制动时,都能有效地防抱死、缩短制动时间、减小制动距离,从而有效地改善了车辆的制动性能。

摘要：中国最早的电视谈话节目是从人文开始的,根据何勇、潘可武的《电视是让人说话的》对《东方时空》创办五周年研讨会的综述,开办谈话节目的出发点是在技术上同期声已经没有障碍,但是人们看到的电视新闻相当多还是只见嘴巴在动却没有声音。从《实话实说》到《对话》,从《讲述》到《艺术人生》,谈话节目已经成为了一种常态的节目形式,

摘要：运用四重实时荧光聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)对转基因玉米及其深加工制品进行筛选检测。选定花椰菜花叶病毒35S启动子(pCaMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子(tNOS)以及根癌农杆菌CP4蛋白基因和5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因(EPSPS)为外源基因,选定编码玉米淀粉合成酶异构体zSTSII-2(zSSIIb)基因作为玉米物种的内参照基因。设计和合成靶标基因特异性引物和多重荧光探针,经特异性、重复性、灵敏性和适用性等方法学验证建立了四重实时荧光PCR检测方法。结果表明该方法检测特异性强,重复性好,扩增效率在90%~110%,标准曲线相关系数R^2≥0.99,最低检测限为每20μL反应13个拷贝,最低定量限为每20μL反应1.3个拷贝,其检测结果与SN/T 1204—2016标准方法检测结果一致,由于四个目标基因可以在一个反应管中进行扩增反应,且含有内源基因和外源基因,可降低试剂成本,简化操作程序,缩短检测时间,为玉米及其深加工产品转基因成分的快速检测提供参考。

摘要：本研究运用多重实时荧光聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)对转基因大豆及其深加工制品进行筛选检测。通过设计大豆内源基因植物凝集素(Lectin)和常用的外源基因花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)、根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因终止(nos)的特异性引物和探针,反应条件和反应体系的优化,特异性、重复性和灵敏性的实验比对分析等开发建立了多重荧光定量PCR检测技术。以10%Roundup Ready转基因大豆标准品为材料,建立并优化转基因大豆的定量检测体系,对大豆中的转基因成分进行定量分析。结果表明:该方法重复性好,检测特异性强,扩增效率在90%～110%,标准曲线相关系数R2≥0. 98,确定了最低检测限为每20μL反应2. 4个拷贝。结论:由于使用多重实时荧光PCR技术,可实现一管多检的实际需要,降低试剂成本,缩短检测时间,为大豆及其深加工产品转基因成分的快速检测提供了有效方法,为促进农产品和食品进出口提供技术保障。

摘要：采用多重实时荧光PCR技术的高通量特征,对转基因玉米MIR604、GA21、DAS-40278-9和98140的特异性靶标序列设计TaqMan-MGB荧光探针,通过退火温度和引物探针浓度梯度优化建立了四重实时荧光PCR检测方法,经特异性,重复性和灵敏性等方法学验证确认了方法的可靠性。MIR604、GA21、DAS-40278-9、981404个特异性基因的标准曲线回归方程分别为y=-3.263 x+36.632,y=-3.422 x+36.384,y=-3.294 x+38.978和y=-3.278 x+37.514;Ct值变化范围分别在23.556~37.524、22.893~37.412、25.304~39.110和24.501~37.618之间;标准偏差分别在0.078~0.476,0.085~0.463,0.120~0.487和0.148~0.353之间;相关系数R 2分别为0.997,0.996,0.995和0.993;检出限可达10个拷贝,扩增效率满足欧盟等国际要求。

摘要：基于可靠性理论,结合有限元结构优化方法进行某悬架下摆臂的轻量化设计。轻量化设计后的结构质量略有减少,结构可靠性大大增加,达到了结构优化设计的目的。优化后的结构在原理样车上的应用验证了有限元分析结果的正确性和该优化设计方法的可行性。

摘要：解说是一种艺术的再创作。本文以第十四届精神文明建设"五个一工程"特别奖作品——电视纪录片《使命》的解说创作为例,探讨了播音员如何运用创作技巧进行情感的深度表达和意境的完美营造。