摘要：背景:差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的应用较多,细胞换液过程中使用含血清的培养基主要针对成纤维细胞的去除,而对神经元的去除作用不明显。目的:根据神经元体外培养需要血清的特性,拟利用无血清培养基在体外建立一种分离培养嗅鞘细胞的简单方法。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/2009-01在哈尔滨医科大学动物实验中心完成。材料:成年SD大鼠10只,由哈尔滨医科大学实验动物中心提供。方法:在差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的基础上,剪开大鼠颅骨,显露位于颅腔前方的嗅球,取出2只嗅球,在显微镜下去除嗅球表面的软脑膜和毛细血管及外周组织,保留富含嗅鞘细胞的嗅神经层和嗅球颗粒层,剪成1mm3小块分离获取单细胞悬浮液,调整细胞密度至1×107L-1,接种在用poly-l-lysine包被的培养瓶或培养板中,于37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中培养,第3天用无血清DMEM/F12培养基换液培养。主要观察指标:嗅鞘细胞的形态学观察、生长曲线分析、免疫荧光染色结果。结果:培养前3d细胞数目无明显增加,甚至减少;然后细胞数目逐渐增多,13d细胞基本长满;传10代后细胞形态发生明显变化,胞浆内出现许多空泡,细胞增殖速度减慢或停止。纯化培养10d后,培养板内双极和三极细胞均呈GFAP,NGFRp75阳性。结论:在差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的基础上,利用无血清DMEM/F12培养基进行换液培养可使嗅鞘细胞迅速增殖,是一种效率较高的体外培养方法。

摘要：目的探讨基于精准教学的翻转课堂教学模式在神经外科临床实践教学中的应用效果。方法选取2018年9月至2019年9月哈尔滨医科大学附属第二医院2016级临床医学专业学生118人,采用随机数表将其分为实验组80人(基于精准教学的翻转课堂教学模式组,即A组,40人;单纯翻转课堂教学模式组,即B组,40人)和对照组(传统教学模式组,即C组,38人),学习周期为1周。按照各组教学方法进行临床实践教学,实习结束后比较各组学生理论课考试成绩、临床实践技能考核成绩并进行不同教学方法满意度调查问卷。结果A组与B组理论课考试成绩差异无显著性(P>0.05),但均优于C组(P<0.05);临床实践技能考核成绩A组优于B组与C组,B组优于C组,差异有显著性(P<0.05);A组学生满意度为95%,高于B组(83.3%)与C组(75%),差异有显著性(P<0.05)。结论基于精准教学的翻转课堂教学模式能够明显提高神经外科临床实践与操作能力,激发学生的学习兴趣,培养自主学习能力,学习效率得到显著提高。