摘要：【目的】建立松材线虫微滴式数字PCR检测体系,验证该检测体系的有效性,为松材线虫检测提供一个更精确灵敏的定性检测方法。【方法】基于松材线虫16S rDNA基因序列,使用在线工具设计特异性引物和探针。优化PCR反应条件,明确微滴式数字PCR的最佳反应条件。再以采集自不同地区的6株松材线虫和12株拟松材线虫、滑刃线虫、伞滑刃线虫、垫刃线虫的基因组DNA溶液为模板对该体系的特异性进行检测;以稀释10倍的标准DNA为模板,设置不同浓度梯度来验证该体系的灵敏度;以3个不同浓度的DNA标准品稀释模板检测微滴式数字PCR的可重复性。最后以人工模拟添加线虫样品和感病松木样品DNA提取液为模板对该体系的实用性进行验证。【结果】①设计了松材线虫特异性引物探针一组,引物:P1904-F、P2057-R;探针:Probe-1938。②PCR反应体系经优化,确定其最佳退火温度为55℃。③特异性验证表明,设计的引物探针可以将松材线虫与其他相近种的线虫区分开。④灵敏度检测结果发现,该检测体系的检出浓度在0.51~20000 copies/μL。⑤对3组不同浓度标准样品的可重复性检测发现,该检测体系的变异系数在9.12%~0.31%,并且样品浓度与变异系数呈负相关。⑥使用该检测体系检测林间感病松木样品和人工模拟加入松材线虫的样品发现,该检测体系能够特异地检测出样品中的松材线虫,且拷贝数与样品中的线虫量呈正向相关。【结论】本研究建立了松材线虫微滴式数字PCR检测体系,该方法特异性好,检测灵敏度高,变异系数小,可高效地检测出样品中的松材线虫。该体系的建立可为松材线虫病理学和生态学研究提供可靠的研究数据。

摘要：经4年采用全国统一的鉴定方法和稻瘟病统一鉴别品种,对重庆稻区340个稻瘟病菌单孢菌株和19个水稻主栽品系进行抗瘟性监测明确,重庆稻区稻瘟病菌生理小种组成复杂多样,优势种群突出,优势小种不明显,主推水稻品种(系)抗性水平低.应用二次通用旋转设计及微电脑技术,探讨稻瘟病常发重病区种植优质丰产感病品种(系),纯氮施用量X1、栽插密度X2、施药次数X3三因素五水平对其病情和产量的效应,建立了穗颈瘟病指(Y1)和产量(Y2)同可控栽培因子间的数学模型:Y1=18.122 4+0.560 1 X1-0.695 5 X3+0.529 4 X2 3;±0.739 8,Y2=386.604 3+9.368 1 X1+6.163 4 X2+15.407 8 X3～6.270 8 X2 1-8.620 8 X2 2±7.821 1,并提出了适合当地水稻控害丰产的优化组配技术.

摘要：B18是一株对十字花科根肿病菌Plasmodiophora brassicae具有抑制作用的优良生防放线菌,其活菌以及发酵液都可抑制根肿病菌休眠孢子萌发。为提高其菌体量以及孢子萌发抑制率,本文以菌体生物量和发酵液抑制根肿病菌休眠孢子活性为指标,通过单因素试验和正交设计优化B18的发酵培养基组分以及培养条件。结果表明:B18最适发酵培养基(1L)为蔗糖20 g,大豆粉10 g,牛肉膏5 g,NaCl 2.5 g,CaCO32.0 g;且在初始pH 7.0,初始接种量3%~7%,装瓶量150 mL/250 mL,温度25~30℃,150~200 r/min下发酵72 h所得的发酵液对孢子萌发抑制率最高且菌体量最大。随后测定了发酵条件优化后的B18发酵液的热、酸碱、紫外线以及储藏稳定性。结果表明:B18发酵产物的热稳定性较差,40℃以上其抑菌活性随着温度的升高而降低;发酵液在酸性、中性以及弱碱性条件下稳定性较好,在强碱性条件下稳定性变差;发酵液对紫外线不敏感,有较好的稳定性;发酵液在4℃条件下更稳定,30 d时孢子萌发抑制率仍可达到61.58%,常温条件下不稳定,15 d后抑制率明显降低。

摘要：在重庆市涪陵区研究了深沟排水对茎瘤芥根肿病的控害效果。结果表明:(1)深沟排水对茎瘤芥根肿病有一定的控制效果,其控害程度因沟的深浅组配及开挖宽度的不同有显著差异;(2)不同的挖沟设计间的减产植株率及绝收植株率差异明显。由此提出病区最佳排水沟开挖设计为3.0m×1.5m×3.0m(深—浅—深)。

摘要：在当地较高施肥水平下,应用二元二次通用旋转组合设计,研究了播期(x1)、密度(x2)对茎瘤芥(榨菜)新组合“涪杂2号”瘤茎产量的效应,结果表明:(1)播期对瘤茎产量有显著的正效应,密度对产量有不明显的负效应;二者为影响产量的主要因子;(2)播期和密度的组配对茎瘤芥产量具较明显的负效应,由此建立了小区产量与播期,密度二因子间的回归数学模型。

摘要：为了给重庆市涪陵区两季茎瘤芥栽培提供技术支撑,采用裂区试验设计,研究不同播期、不同品种、不同育苗方式对第二季茎瘤芥生育期及产量的影响。结果表明:播期、品种、育苗方式对第二季茎瘤芥生育期影响较大。试验范围内随着播期推迟,营养生长期缩短,极差3.5天,减幅2.2%;瘤茎生长期缩短,极差39.8天,减幅41.5%;日历苗龄增长,极差20.0天,增幅达60.6%。‘涪杂7号’与‘永安小叶’相比,膨大始期平均提早2.0天,瘤茎生长期长6.3天,现蕾期晚4.3天,营养生长期长4.3天。7cm直径营养钵与100孔塑料穴盘2种育苗方式生育期相同,但比同期常规育苗营养生长期短2.0天,瘤茎生长期长2.7天,瘤茎膨大始期提早4.7天。最佳处理组合为A1B2C1,即播期为9月30日,品种为‘涪杂7号’,采用7cm直径塑料营养钵育苗,产量可达72650.0kg/hm2。