摘要：目的克隆白纹伊蚊紫外光敏感视蛋白(UV-opsin)基因,分析该基因编码蛋白的序列特征,为研究视蛋白基因的生物学功能提供分子基础。方法根据已报道蚊虫的UV-opsin的保守序列设计简并引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增白纹伊蚊的UV-opsin基因,纯化PCR产物,经Eco RⅠ酶和XhoⅠ酶酶切,酶切产物连接至pET28a(+)载体构建原核表达质粒,阳性重组质粒经PCR鉴定后进行基因测序,利用Expasy、Protparam、Tmpred及ScanProsite等软件进行编码蛋白的结构特征分析及功能预测,利用Clustal X 1.81和MEGA 6.0软件进行序列同源性分析,构建系统进化树。结果成功获得白纹伊蚊UV-opsin的cDNA序列。序列分析表明,该序列全长为1 146 bp(含终止密码子),编码381个氨基酸,理论蛋白相对分子质量为42 500,等电点为7.06。与白纹伊蚊(XP029730343)序列同源性为99.74%,与埃及伊蚊(ABF18478)序列同源性为96.85%。构建系统进化树发现不同属、不同目的昆虫为独立分支,伊蚊属与库蚊属聚成一簇,之后与按蚊属合并。该视蛋白具有7个跨膜拓扑结构,含有1个G蛋白偶联受体位点,4个N-豆蔻酰化位点、3个N-糖基化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点、3个蛋白激酶C磷酸化位点以及2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。该视蛋白含有保守的LRTPSN、DRY和QAKK基序,为视蛋白发挥作用的重要基序。结论成功克隆获得了白纹伊蚊的UV-opsin序列,该序列具有典型的视蛋白结构特征,为进一步研究白纹伊蚊视蛋白的功能奠定了基础。

摘要：目的进行不同品系白纹伊蚊转铁蛋白基因表达量的分析。方法据二维电泳获得肽段序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在白纹伊蚊抗性品系、敏感品系、现场采集品系蚊体内的表达水平差异。结果成功扩增白纹伊蚊转铁蛋白基因片段,荧光定量PCR表明转铁蛋白基因在抗性品系蚊体内的表达量是敏感品系的10.51倍,现场品系是敏感品系的5.22倍。结论白纹伊蚊转铁蛋白基因可做为新的抗性检测及治理基因靶标。

摘要：目的分析淡色库蚊抗性品系、敏感品系、微山湖现场品系蚊体内酚氧化酶基因表达量。方法根据酚氧化酶基因序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测不同品系淡色库蚊体内的酚氧化酶基因表达水平差异。结果酚氧化酶在昆虫的正常发育过程中具有重要的生理作用,酚氧化酶基因在抗性品系蚊体内的表达量是敏感品系的6.74倍,微山湖现场品系是敏感品系的4.19倍。结论淡色库蚊酚氧化酶基因可做为新的抗性检测及治理基因靶标。

摘要：目的观察转苏云金杆菌CrylVD基因蓝藻实验室对淡色库蚊、白纹伊蚊和中华按蚊不同龄期幼虫杀灭效果。方法利用不同浓度的工程藻,分别作用于淡色库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊敏感品系III龄幼虫,以及它们不同龄期的幼虫,并设计阴性及空白对照,分别于24H、48H计数死亡率,从而分析基因蓝藻的杀蚊幼毒效。结果工程藻对三种蚊种III龄幼虫均具有杀灭作用,对淡色库蚊、白纹伊蚊幼虫杀灭效果较高,对中华按蚊幼虫效果较差。48H对以上三种蚊虫III龄幼虫的杀灭率分别为100%、100%和42%;工程藻对低龄幼虫的杀灭效果高于高龄幼虫,即龄期越低对工程藻的敏感性越高,杀蚊毒效与龄期呈负相关。结论转苏云金杆菌CrylVD基因蓝藻具有明显杀蚊幼效果,为今后蚊虫防治提供了新的方法。

摘要：目的　制备敌敌畏抗性品系淡色库蚊酯酶B1、A2探针 ,并应用于抗性品系及敏感品系的检测。　方法　分别设计酯酶B1、A2上下游引物 ,5’端地高辛标记 ,PCR法制备DNA探针 ,分子杂交检测各个品系淡色库蚊。　结果　摸索出合适的区分抗性与敏感品系的探针浓度 ,在该浓度下各品系杂交点的阳性率有差别。应用酯酶B1探针检测各品系蚊虫 ,抗敌敌畏品系的阳性率为 40 .0 % ,抗残杀威品系的阳性率为 2 3 .3 % ,抗氯氰菊酯品系的阳性率为 18 3 % ,敏感品系的阳性率为 11 7% ;应用酯酶A2探针检测各品系蚊虫 ,抗敌敌畏品系的阳性率为 43 3 % ,抗残杀威品系的阳性率为 2 5 0 % ,抗氯氰菊酯品系的阳性率为 2 1 7% ,敏感品系的阳性率为 15 0 %。　结论　应用酯酶B1、A2探针能够区分抗性品系 ,因此能够用于抗性的测定。从而为抗有机磷类杀虫剂媒介昆虫基因检测的实用性和抗性分子生物学机制的研究打下基础。