摘要：为探究DNA条形码技术在微生物识别方面的应用前景,对食品中常见的8种病原微生物的16S rRNA序列进行了比对,设计通用引物后,进行PCR扩增、测序及数据库检索,尝试建立一套基于DNA条形码的微生物识别方案。结果表明,扩增的V3~V6可变区域能准确区分变形杆菌纲(肠杆菌目、弧菌目、假单胞菌目)的致病菌和相关干扰菌,对芽孢杆菌纲(芽孢杆菌目)可鉴定到“属”水平。

摘要：将5种致泻大肠埃希氏菌的毒力基因保守序列进行设计并合成了引物和探针,建立的多重实时荧光PCR4种试剂盒可以同时检测5种致泻大肠埃希氏菌。结果表明:4种试剂盒的12对毒力基因通过5种致泻大肠埃希氏菌的标准储备菌株均得到验证;并且12对毒力基因只对对应的致泻大肠埃希氏菌特异性起作用,对常见的食源性致病菌都无扩增曲线;escV、bfpB、stx1、ipaH和invE基因的检出限是10CFU/mL,aggR基因的检出限是102CFU/mL,astA和pic基因的检出限是103CFU/mL,而stx2A、ipaH和stIb基因菌液浓度<10CFU/mL时,均可观察到明显的"S"型扩增曲线,且线形较好;并且对抽查和委托检验的肉类、奶和动物腹泻物以及人工污染样品等40份样品进行检测,共检出11份阳性样本,与GB4789.6-2016标准检测结果相一致,表明建立的4种试剂盒方法具有良好的实用性。