摘要：目的探讨分子生物学方法在临床标本结核分枝杆菌利福平（ＲＦＰ）耐药性评估中的应用价值。方法设计针对ｒｐｏＢ基因１８３ｂｐ扩增引物，运用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲＳＳＣＰ）银染色方法，检测了４５株结核杆菌临床分离株，并对其中部分菌株进一步做了ＤＮＡ序列分析。结果以药敏试验结果为对照，有１６株ＲＦＰ敏感株及２６株ＲＦＰ耐药株经ＳＣＰ方法得到检测，阳性占９３．３％，特异性１００％。对部分菌株１８３ｂｐ片断测序结果显示，ＲＦＰ敏感株无ｒｐｏＢ基因突变，耐药株均发生碱基突变，分别导致编码５３１及５２６位点的氨基酸改变。结论银染ＰＣＲＳＣＰ方法具有简便，快速，准确的特点，提高敏感性，可以对临床标本结核杆菌利福平耐药突变进行鉴定。序列分析证明结核分枝杆菌利福平耐药菌株有ｒｐｏＢ基因突变。