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靶向rPTTG的shRNA慢病毒载体构建及沉默效率评价: 收藏
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引用; 《山东大学学报（医学版）》2009年第9期47卷 76-80页; 作者：王灿王潍博牟成志申蓉李文欢山东大学附属山东省立医院化疗科济南250021 山东大学附属山东省立医院神经外科济南250021; 目的构建并筛选能高效沉默大鼠垂体瘤转化基因(rPTTG)的shRNA慢病毒重组载体。方法设计并合成4组特异性针对大鼠PTTG基因的shRNA序列将其构建到慢病毒载体pGCL-GFP中;评估慢病毒重组载体在大鼠肾细胞中的转染效率并运用real time PCR技...; 目的构建并筛选能高效沉默大鼠垂体瘤转化基因(rPTTG)的shRNA慢病毒重组载体。方法设计并合成4组特异性针对大鼠PTTG基因的shRNA序列将其构建到慢病毒载体pGCL-GFP中;评估慢病毒重组载体在大鼠肾细胞中的转染效率并运用real time PCR技术检测各组重组载体对目的基因的沉默效果。结果PCR及测序结果显示,目的片段插入正确,重组载体构建成功,慢病毒重组载体转染效率达70%以上;4组shRNA序列均有基因敲减效果,并且第4组shRNA(4#shRNA)序列效果最为明显(>80%)。结论成功构建了高效沉默rPTTG基因的慢病毒载体;验证了慢病毒载体作为RNAi载体工具转染效率的可靠性;实验显示4#shRNA能高效抑制内源性rPT-TG基因表达。; 来源：详细信息评论

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