摘要：目的利用真核表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP miR载体构建针对人Nrf2基因的微小RNA（microR-NA）真核表达载体,为研究Nrf2基因在化学物毒作用提供参考依据。方法设计特异性针对Nrf2基因的寡核苷酸序列,构建重组载体并命名为pcDNA-Nrf2-A、pcDNA-Nrf2-B、pcDNA-Nrf2-C、pcDNA-Nrf2-D,转染人乳腺癌MCF-7细胞;通过荧光显微镜观察绿色荧光监测转染效率,转染48 h后用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫细胞化学检测瞬时转染细胞Nrf2基因mRNA和蛋白的表达变化观察沉默作用来初筛有效的重组载体。结果成功构建miRNA真核表达载体pcDNA-Nrf2;转染效率约为20%~40%;瞬时转染重组质粒48 h后,与空白对照和阴性对照质粒比较,pcDNA-Nrf2-A Nrf2 mRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）;pcDNA-Nrf2-B、pcDNA-Nrf2-C、pcD-NA-Nrf2-D mRNA表达降低,差异有统计学意义（P〈0.001）,pcDNA-Nrf2-C抑制Nrf2基因mRNA表达强于pcDNA-Nrf2-D（P〈0.05）。结论成功构建了Nrf2的microRNA表达载体pcDNA-Nrf2-C,可作为进一步研究Nrf2基因功能的工具。

摘要：目的研究玉米赤霉烯酮(ZEA)和氯化镉(CdCl2)联合作用对MCF-7细胞增殖的影响。方法调整MCF-7细胞密度约为1×10~5/mL,以0(对照)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5)、10^(-4)、10^(-3)mol/L CdCl_2分别染毒MCF-7细胞24h,以0(对照)、6.25、12.5、25、50、100nmol/L ZEA分别染毒MCF-7细胞24h,采用CCK-8法检测CdCl_2和ZEA对MCF-7细胞增殖的影响,同时进行3×3析因设计研究CdCl_2和ZEA对MCF-7细胞增殖的联合作用。结果 CdCl_2和ZEA分别在10^(-6) mol/L、100nmol/L时促增殖效应均达到最大,相对增殖率分别为112.3%和114.6%,明显高于阴性对照组的100.0%;析因实验结果显示CdCl_2和ZEA对MCF-7细胞增殖的影响表现为相加作用。结论 CdCl_2和ZEA在一定剂量范围内能促进MCF-7细胞增殖,表现为明显的拟雌激素活性,二者联合作用表现为加和效用。