摘要：为高效表达具有高抗菌活性的抗菌肽,根据Magainin 2(MA)、Sapecin(SA)和Melittin(ME)基因核心序列,设计杂合抗菌肽MA-SA-ME(MSM)基因并进行密码子优化。生物信息学分析显示,该抗菌肽具有很好的抗菌作用。将MSM基因与毕赤酵母表达载体pPICZα-A连接,构建重组表达载体pPICZ-αA-MSM,以实现抗菌肽基因MSM在毕赤酵母GS115中进行分泌表达。构建的重组表达质粒经PCR检测、双酶切和测序3步鉴定表明,构建的重组表达质粒与预期完全相符,可用于下一步的毕赤酵母表达试验。

摘要：从掌叶半夏(Pinellia pedatisecta Schott)块茎中提取总RNA,反转录合成cDNA。根据GenBank中已报道的天南星科凝集素基因序列,设计带有酶切位点的表达引物,用RT-PCR方法扩增出掌叶半夏凝集素(Pinellia pedatisecta agglutinin,PPA)基因。PPA经双酶切后与表达载体pGEX-6P-3连接,构建pGEX-PPA重组表达载体。通过PCR、双酶切及测序鉴定,结果表明,重组载体pGEX-PPA构建成功,为进一步进行PPA的原核表达及其功能研究奠定了基础。