摘要：目的:本研究旨在建立刺梨中鞣花酸的分离纯化方法,并对提取鞣花酸的酸水解法进行工艺优化。方法:以刺梨干果为原料,通过超声辅助提取法提取单宁酸,加酸进行水解制得粗鞣花酸,并通过甲醇重结晶进行纯化,采用高效液相色谱测定其纯度,及核磁共振波谱法(NMR)、红外光谱法(IR)、质谱法(MS)、高效液相色谱法(HPLC)、紫外光谱法(UV)对提取得到的鞣花酸进行结构确证,另外,以得率为指标,以酸浓度、提取温度、提取时间、液料比为自变量,在单因素实验的基础上,通过Box-Benhnken中心组合设计和响应面分析法确定刺梨鞣花酸的酸水解工艺条件。结果:从刺梨中提取得到了鞣花酸提取物,通过HPLC分析测定其纯度达到92%,鞣花酸提取物的最大吸收波长254 nm,分子离子峰m/z 301.00,红外吸收各波数与标准品一致,并利用^(1)H-NMR,^(13)C-NMR确定了其结构。通过响应面法得到了酸水解法制取鞣花酸的最优工艺:酸浓度5%,提取温度127℃,液料比为8:1 mL/g,提取时间9.8 h,在此条件下刺梨鞣花酸的得率为30.2%±2.3%(与预测值相比P>0.05)。结论:本研究建立了一种刺梨中鞣花酸简便高效的纯化方法并对其进行了结构确证,并获得了酸水解法制取鞣花酸的最优工艺,为刺梨资源的开发利用提供了参考。

摘要：目的:考察药用辅料聚乙二醇400(PEG400)对黄芩苷及其主代谢物黄芩素6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(B6G)胆汁排泄的影响,并分析其作用机制。方法:大鼠随机分为黄芩苷+水组与黄芩苷+PEG400组,利用10%水合氯醛(剂量4 mL·kg-1)腹腔注射诱导麻醉,制作大鼠胆管插管模型,待大鼠完全清醒后,以168 mg·kg-1剂量的黄芩苷分别给大鼠灌胃相应的黄芩苷水溶液和黄芩苷PEG400溶液,收集给药后0~12 h的胆汁,使用UPLC-MS/MS测定不同时间段药物经胆汁排泄的浓度,采用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9μm),流动相乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~9 min,90%~27%B;9~10 min,27%~90%B;10~12 min,90%B),流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,进样量5μL;质谱条件为电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式。利用体外孵育法和酶联免疫吸附测定(ELISA)研究PEG400对尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)1A8和UGT1A9活性及二者在大鼠肝脏中表达的影响。结果:与黄芩苷+水组相比,黄芩苷+PEG400组大鼠12 h内胆汁中黄芩苷及其主代谢物B6G的累积排泄量分别增加了1.8,2.1倍;PEG400分别使UGT1A8与UGT1A9的酶活性提高了2.0,1.5倍,使肝脏中UGT1A8与UGT1A9的质量分数提高了2.2,1.3倍。结论:PEG400可通过提高UGT1A8与UGT1A9的活性和表达来显著增加黄芩苷及其主代谢物B6G的胆汁排泄,且对B6G胆汁排泄的促进作用大于原形药物黄芩苷,可为PEG400的临床合理应用及黄芩苷等黄酮类药物新剂型的设计提供依据。

摘要：本文旨在考察不同相对分子质量(MW:400、1 000、4 000)的药用辅料聚乙二醇(PEGs)对黄芩苷药代动力学的影响,并初步分析其作用机制。分别给大鼠灌胃相应的黄芩苷(168 mg·kg~(-1))+水溶液和黄芩苷+PEGs溶液收集给药后0~24 h内的血浆,使用UPLC-MS/MS测定不同时间点黄芩苷及其主要代谢物黄芩素6-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(B6G)在血浆内的浓度,并以DAS 3.0软件求算药代动力学参数。基于体外代谢酶孵育法探究不同相对分子质量的PEGs对尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A8 (UGT1A8)和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A9 (UGT1A9)活性的影响。不同相对分子质量的PEGs与黄芩苷共给药后,显著提高了黄芩苷及B6G的AUC_(0-t),同时使C_(max)升高t_(1/2)延长,结果表明PEGs能有效提高黄芩苷及B6G的体内浓度,其机制可能为不同相对分子质量的PEGs能够促进UGT1A8和UGT1A9的活性,使得黄芩苷和B6G的转化速率提升,其中对B6G的促进程度高于原型药物黄芩苷,表明PEGs对UGT1A8具有更高的亲和力,其中以PEG400的作用最为显著。本研究以期对黄芩苷等黄酮类药物的临床安全用药及PEGs参与的药物新剂型的设计提供依据。本研究中动物实验方案已获得贵州医科大学实验动物伦理委员会的批准。

摘要：目的研究体外联用龙血竭和蜘蛛香对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌和白色念珠菌的抗菌效应。方法采用棋盘格法设计,以固体培养基连续稀释法测定药物单独应用和最佳组合效应时对各实验菌的最低抑菌浓度(MIC),计算部分抑菌浓度(FIC)指数,判定联合抑菌效应。结果龙血竭和蜘蛛香联合用药后,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌的FIC指数分别为0.75、0.5、0.625;试验浓度的龙血竭对大肠埃希菌的抑菌效果均较差,与蜘蛛香联合用药后,其MIC=2 mg·m L-1,FIC<1。结论龙血竭与蜘蛛香联合用药对4株供试菌均具有良好的协同抗菌作用,可为临床用药提供参考。