摘要：以猪源胰蛋白酶作为研究对象,尝试利用删除猪源胰蛋白酶活性位点邻近?-loop的方法来提高其热稳定性和活性。首先通过Gromacs v4.5.5分子动力学模拟软件,预测出了胰蛋白酶的柔性区Fragment 41~46(即?-loop所在区域)。然后根据删除?-loop结构中不同的氨基酸数目,确立了三个突变R1Q、K3Q及C5Q;通过重叠延伸PCR技术构建突变菌株,发酵表达后,进行了酶热稳定性和活性分析。结果表明,R1Q、K3Q及C5Q的活性在一定程度上均有提高,在热稳定性上R1Q和K3Q有所提高,C5Q有所下降,其中R1Q突变体酶的最高活性较野生型提高了1.42倍,同时,失活半衰期和最适反应温度较野生型也分别提高了213.3 min和11.8℃。实验结果证明,在删除该?-loop中的异亮氨酸后,得到了突变型R1Q酶,成功实现酶双功能的共同进化。该策略有潜力应用于其他工业酶分子的热稳定性和活性改造,为推动生物酶的工业化应用奠定基础。

摘要：对于在固定床催化反应器中进行的强放热反应,当初始条件达到或超过某一限度时,反应系统瞬间产生的热量超过了反应系统本身所能承受的限度或负荷,造成热点温度急剧升高,导致反应系统失去控制,对反应的转化率、选择性以及催化剂的活性和寿命等都有不良影响。对反应系统参数敏感性的研究,实质上就是从理论上揭示出反应系统安全操作上限,使之由于温度升高引起的不良后果能在反应器的设计中和操作前就能避免。文中对上述问题进行了详尽而完整的概括,对今后的发展提出了建议。

摘要：以牛肠激酶作为研究对象,利用理性设计的方法提高其热稳定性。首先通过分子动力学模拟软件Gromacs v 4.5.5,Flex Service以及B-FITTER软件预测出了肠激酶的柔性区Fragment 64~69,Fragment 85~90;然后结合β-转角序列统计学信息以及引入位置原有的残基不参与形成氢键的原则,确立了3个突变位点S67P,R87P以及Y136P;通过Quik Change^(TM)定点突变的方法引入突变位点,并进行了酶热稳定性分析。结果表明,R87P突变体酶的失活半衰(t_(1/2))和T_(50)^(10)较野生型分别提高了3.1 min和11.8℃,同时,动力学常数(K_m/k_(cat))测定结果显示酶活未受到显著影响。该策略有潜力应用于其他工业酶分子的热稳定性改造,为推动生物酶的工业化应用奠定基础。

摘要：提出了一种子空间可调的模糊-神经网络(FNN),通过采用新型的网络结构设计、模糊子空间均匀化设计和模糊子空间可调性设计,提高了网络的模拟、预测精度,明显缩短了训练时间.通过可调模糊-神经网络可以对系统进行预测、优化及因素分析,并将所提出的模糊神经网络应用于谷氨酸流加发酵过程的模拟与预测,取得了满意的结果.

摘要：生物技术是解决全球性经济问题的关键,生化工程是一个多学科交叉领域,其任务就是把生物技术转化为生产力。今后10～20年,生化工程研究与开发主要涉及如下3方面:(1)生物高技术医药产品;(2)生产小分子及专门生物产品;(3)环境。生化工程研究主要前沿领域包括:(1)生物大分子结构模拟及蛋白质药物工程设计;(2)基因工程菌发酵战略及过程动力学模拟;(3)生物反应器中分子、遗传、代谢、细胞功能与调节的研究;(4)生物产品最优分离和纯化方法研究;(5)生物反应、分离过程检测、控制、系统分析及上下游集成的研究。本文还对美国、欧洲、日本及中国生物技术产业化情况进行了分析比较,就加快我国生物技术产业化及有关生化工程教育及培训基地建设提出了建议。

摘要：神经氨酸苷酶 (NA)是流感病毒的一种主要表面糖蛋白 ,在病毒致病过程中起重要作用 .本文对以NA为药物靶点 ,设计的各种NA抑制剂作以综述 .

摘要：目的研究紫杉醇纳米制剂的药动学,荷瘤小鼠的组织分布及系统毒性。方法对紫杉醇纳米制剂与市售紫杉醇注射液进行系统比较研究。结果(1)药动学:相同剂量的紫杉醇纳米制剂与紫杉醇已上市注射液静脉注射自身前后交叉设计,犬血药浓度采用HPLC法测定。PK结果表明,纳米制剂AUC、CL比同剂量注射液低(3.710±0.961vs 6.984±1.694μg.h/ml,9.032±2.051 vs 4.964±1.599ml/***),其它参数比较无明显差异;(2)荷瘤小鼠组织分布:昆明种小鼠腋皮下接种H22肝癌细胞,瘤长至约1g后,随机分为2组(2.5mg/kg、4.0mg/kg),腹腔注射给药。两制剂均对H22肝癌细胞显示出良好的肿瘤治疗效果,且以2.5mg/kg纳米制剂组疗效更优;采用LC-MS/MS方法测定了二制剂在H22肝癌细胞荷瘤小鼠体内的主要组织分布,皆以小鼠胰腺、脾脏、卵巢分布最多,但纳米制剂明显高于注射液,血液分布低于注射液;(3)系统毒性:比格犬30只,♀♂各半,随机分为纳米制剂与注射液各2组(40mg/m2、80mg/m2),1个辅料对照组,单次静脉给药。给药后一般毒性反应症状与程度、血常规、血生化2组比较无明显差异;给药后14d处死动物,大体解剖无肉眼可见改变,脏器系数无明显异常;病理检查发现肝、肺有明显的病理改变,病理改变形式基本一致,但80mg/m2组病变程度明显比40mg/m2组重;40mg/m2给药时纳米制剂引起的病变程度比注射液轻。结论紫杉醇制成纳米制剂后,其体内药动行为发生明显变化,其组织分布快,有靶向趋势;以少于等剂量注射液的给药剂量即可达到相同的肿瘤治疗效果,而所引起的毒副反应明显轻于同剂量的注射液;值得对紫杉醇纳米制剂进行更深入的开发研究。