摘要：胰腺癌发病率呈升高态势，手术切除率低、化放疗敏感性差，是预后最差的消化道恶性肿瘤。纳米药物为胰腺癌的治疗提供了新的选择，其增效减毒的抗肿瘤作用大大提高了传统化疗药物的疗效，而针对胰腺肿瘤微环境设计的具有靶向功能的纳米药物可有效克服胰腺癌的间质屏障，实现更为精准的治疗。本文结合文献，综述纳米药物在胰腺癌治疗方面应用的现状与进展。

摘要：目的观察靶向抑制表皮生长因子受体（EGFR）联合阻断Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞增殖及凋亡的协同作用，探讨二者间的协同作用机制。方法设计并合成针对人EGFR基因特异性siRNA，构建慢病毒pFU-GW—RNAi载体，感染人胰腺癌Panc-1细胞，获得稳定转染细胞株。Real time PCR检测Shh和Glil的表达情况；克隆形成实验和MTI＂法检测细胞增殖情况；流式细胞技术检测细胞凋亡情况；Western印迹方法检测ERK和AKT磷酸化水平变化；裸鼠移植瘤模型检测移植瘤生长抑制情况。结果慢病毒介导的RNAi显著抑制Panc-1细胞EGFR的表达；靶向抑制EGFR后Panc-1细胞对环巴明的敏感性显著增加，细胞增殖能力下降，其半数抑制剂量（IC50）从（2．978±0．336）斗m0L／L下降到（1．698±0．057）μmoL／L，P〈0．05；联合处理组细胞早期凋亡比率高达38．75％，显著高于单独抑制EGFR组（17．65％）及对照组（3．02％），P〈0．05；裸鼠移植瘤实验结果显示联合处理组移植瘤体积（394．8±87．5）mm^3显著低于抑制EGFR组（594．7±86．1）mm^3和单独应用环巴明处理组（771．3±82．9）mm^3；克隆形成实验结果显示联合处理可以进一步抑制细胞增殖；抑制EGFR后胰腺癌细胞ERK和AKT磷酸化水平较对照组显著降低，联合应用环巴明处理后二者磷酸化水平均进一步下降。结论靶向抑制EGFR联合环巴明处理后胰腺癌细胞体内外增殖能力均进一步被抑制，细胞凋亡率进一步增加；其协同机制可能部分与调控ERK和AKT磷酸化水平相关。

摘要：目的应用慢病毒介导的RNA干扰（RNAi）技术建立稳定低表达胰岛素样生长因子1类受体（IGF1R）基因的人胰腺癌Panc-1细胞株，并观察其对吉西他滨化疗敏感性的影响。方法设计并合成3条针对IGF1R基因特异性的RNA干扰靶点，构建慢病毒pFU—GW-RNAi载体，经包装后转染293T细胞，获得病毒上清并测定其相应滴度；感染Panc-1细胞，通过实时定量聚合酶链反应（real—timePCR）鉴定RNA干扰效率；筛选出基因沉默效率最高的慢病毒感染人胰腺癌Panc-1细胞，获得稳定转染细胞株。噻唑蓝（MTT）比色法检测干扰IGF1R后Panc-1细胞对吉西他滨敏感性的变化。裸鼠移植瘤模型检测干扰IGF1R前后体内成瘤能力及吉西他滨对移植瘤生长的抑制作用。结果在Panc—1细胞中成功建立低表达IGF1R基因的细胞株，吉西他滨对Panc-1细胞的半数抑制剂量（IC50）从（0．774±0．001）mg／L下降到（0．330±0．003）mg／L，Panc-1细胞对吉西他滨的敏感性增加了2．35倍。裸鼠移植瘤模型中，干扰IGF1R基因后皮下种植瘤生长缓慢，联合应用吉西他滨后对肿瘤生长的抑制作用进一步增加。结论慢病毒介导的RNA干扰技术特异性沉默IGF1R基因，能显著增强胰腺癌细胞株Panc-1对吉西他滨的敏感性。

摘要：每逢听到电影《上甘岭》的插曲《我的祖国》,我就会对歌唱家郭兰英、词作家乔羽和曲作家刘炽肃然起敬。诚如中国国家话剧院院长田沁鑫所说:精品,从时间上看,是可以常演常新、常看常新;从作品本身来讲,必须思想精深、艺术精湛、制作精良。乔羽用“一条大河”反映祖国新貌,刘炽用音符绘出祖国最美风景,郭兰英用歌声激励人们追寻梦想。郭兰英曾真诚地说:“感谢这首歌的词作者乔羽、曲作者刘炽,是他们写出了每个人对祖国、对家乡的无限热爱之情,引发了每个人的共鸣。”同理,教师、学生、教材合力造就的优质课堂,滋养着祖国的教育事业。

摘要：目的观察特异性阻断hedgehog（Hh）信号通路对胰腺癌Panc一1细胞上皮间质转化（EMT）过程的影响，探讨其分子机制。方法设计并合成针对Smoothened（SMO）基因特异性的RNA干扰靶点，运用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默SMO基因表达以阻断人胰腺癌Panc-1细胞Hh信号通路。应用Matrigel／Transwell法检测阻断Hh信号通路后胰腺癌细胞侵袭能力的变化，应用实时PCR及Western印迹方法检测阻断Hh通路后Panc一1细胞EMT标志物E—cadhefin、N—cadhefin、***、Vimentin、Fibronectin等的表达变化；并检测EMT调控因子Snail、Slug等的表达变化。结果稳定干扰SMO基因表达阻断Hh信号通路后，人胰腺癌Panc-1细胞侵袭能力明显降低，P=0．020；上皮表型标志物***表达明显上调，而间质表型Vimentin、Fibronectin、N—cadhenn等的表达水平显著下调，P值分别为0．020、0．001、0．031和0．022；与对照组相比，SMO干扰组细胞中转录因子Snail、Slug的表达水平均显著下调，P值分别为0．018和0．016。结论应用慢病毒介导的RNA干扰技术特异性沉默SMO基因阻断人胰腺癌细胞中Hh通路活性，可显著抑制Panc-1细胞EMT过程，其机制与下调转录因子Snail及Slug表达有关。

摘要：慢性胰腺炎以胰腺实质纤维化、胰腺导管解剖学改变、胰腺实质钙化或胰管结石形成为特征性病理改变,其典型临床表现为疼痛、消瘦、腹泻与糖耐量异常,即所谓"慢性胰腺炎四联征"。此外,还存在一系列慢性胰腺炎相关并发症所表现出的临床症状,如恶心、呕吐、黄疸、呕血、黑便、腹部包块等。慢性胰腺炎是一种可以累及整个器官的疾病,手术方式应根据胰腺病变的特点进行设计。

摘要：目的观察靶向抑制表皮生长因子受体（EGFR）对人胰腺癌细胞（PANC-1）上皮-间质转化（EMT）过程的影响，探讨其机制。方法设计并合成针对EGFR基因特异的RNA干扰靶点，运用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默人胰腺癌PANC-1细胞EGFR基因表达。应用划痕试验及基质胶侵袭试验检测EGFR干扰后细胞运动、侵袭能力的变化；应用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）及Westernblot法检测转染后EMT相关标志物E-钙粘蛋白（E-Cadherin）、N-钙粘蛋白（N—Cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、纤维粘连蛋白（Fibronectin）等的表达变化，并检测EMT相关转录因子的表达变化；应用细胞免疫荧光共聚焦显微镜检测上述蛋白的定位及细胞形态的变化。结果应用慢病毒介导的RNA干扰技术可特异性抑制人胰腺癌PANC-1细胞EGFR基因的表达。抑制EGFR后PANC-1细胞的运动及侵袭能力显著降低；上皮表型标志物E-Cadherin表达明显上调，间质表型N-Cadherin、Vimentin、Fibronectin等的表达显著下调；与对照组比较，EGFR干扰组细胞由纺锤形变成立方形，伪足消失；EGFR干扰组中EMT相关转录因子Snail及Slug表达显著下调。结论应用慢病毒介导的RNA干扰技术特异性沉默EGFR基因的表达，可显著抑制PANC-1细胞的EMT过程，其机制可能与下调转录因子Snail及Slug表达有关。

摘要：对米贝链霉菌DSM41911进行初步研究,通过对16S rRNA及相关功能基因序列进行生物信息学分析,表明米贝链霉菌DSM41911与冰城链霉菌具有较高同源性。设计16种固体和液体培养基对菌株的发酵条件进行筛选,在MB4、MB6培养基中成功检测到milbemycin B5、milbemycin E、milbemycin VM44864和milbemycin B1。参考近似菌株冰城链霉菌的合成基因并结合文献推测出米尔贝霉素在米贝链霉菌DSM41911中的合成途径,为后续高产菌株的筛选提供参考。