摘要：建立了实时荧光环介导恒温扩增技术(LAMP)检测罗非鱼中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的方法,并对方法的灵敏度和特异性进行了评价。针对金黄色葡萄球菌特异性耐热核酸酶ncu基因设计引物进行LAMP扩增。选取LAMP内外引物浓度比、d NTP浓度、Bst聚合酶用量、甜菜碱添加量、扩增温度和扩增时间6个因素进行单因素优化实验,优化确定了其LAMP扩增条件。在优化条件下,该方法的检测限为37 cfu/m L,方法对污染的副溶血弧菌、志贺氏菌、沙门氏菌和大肠杆菌4种病原菌均不呈现非特异性扩增,具有良好的特异性,同时结合实时荧光检测,可以较好地弥补LAMP终点显色无法区分非特异性扩增的缺点。结果表明,该方法用于检测罗非鱼中污染的金黄色葡萄球菌具有灵敏度高、特异性强、操作简便、快速的特点,在食品安全检测方面具有良好的实际应用前景。

摘要：为提取虾头蛋白制备虾味调味品,提高虾头副产物的附加值,优化虾头酶解工艺。并探讨虾头酶解液在模拟鱼翅加工中的利用。通过超声波辅助木瓜蛋白酶法提取虾头蛋白,探讨超声功率、超声时间、粒径、酶解温度、pH值、料液比、酶添加量、酶解时间对虾头蛋白水解度的影响,通过响应面试验法优化提取工艺。通过向模拟鱼翅胶液中添加不同含量虾头酶解液的水溶液,探讨酶解液含量对模拟鱼翅感官的影响。超声波辅助酶法提取虾头蛋白的最佳提取条件为:按料液比1∶10(g/mL),酶添加量8 000 U/g,粒径0.2 mm^0.3 mm的虾头中添加木瓜蛋白酶,调节pH值至7.5,在超声功率120 W条件下处理20 min后,60℃下酶解时间3 h,此条件下虾头蛋白的水解率可达65.25%(以虾头蛋白质量计)。添加80%虾头酶解液制备的模拟鱼翅已具备较优的感官特性。

摘要：为提高金鲳鱼加工副产物——鱼皮的利用率,本研究在前期单因素实验的基础上,以加酶量、液料比和提取时间三个单因素建立模型,采用响应面法Box-Behnken设计实验,优化了胃蛋白酶法提取金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白(PSC)的提取工艺,并与酸溶性胶原蛋白(ASC)进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶变换红外光谱和差示扫描量热仪等基本理化特性的对比研究。结果表明,金鲳鱼鱼皮胶原蛋白的最佳提取工艺为:加酶量1.5%、液料比23∶1 m L/g、酶解时间27.5 h。此条件下通过实验验证得出,金鲳鱼鱼皮胶原蛋白实际提取率为64.68%,与响应面模型理论预测值65.17%基本一致;此外,本实验提取的PSC有较高热变性温度(30.44℃),与金鲳鱼皮ASC有相似的电泳性质和红外峰型,初步鉴定为I型胶原蛋白。该实验为金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原的提取提供了理论参考。