摘要：为了解硅(Si)和硒(Se)对盐胁迫下小麦光合生理及养分吸收的缓解机制,采用盆栽试验,以不设置盐胁迫、不施Si和Se为对照(CK),研究盐胁迫(SS)及外源施用Si(SS+SI)、Se(SS+SE)及其组合处理(SS+SI+SE)对小麦光合气体交换参数、叶绿素荧光参数、光合作用酶活性及养分累积的影响。结果表明,与CK相比,盐胁迫处理(SS)显著降低了光合色素(叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素)含量、光合气体交换参数(P_(n)、G_(s)、T_(r))、叶绿素荧光参数(F_(v)/F_(m)、q P、Φ_(PSⅡ))及光合作用酶(RuBPCase、FBPase、FDA)活性,显著提高了胞间CO_(2)浓度和非化学淬灭系数,在此基础上外源施用Si、Se均在一定程度改善了上述光合生理参数。盐胁迫下外源施用Si、Se及其组合处理均显著提高了叶片N、K、Mg、Fe、Zn含量,整体以二者组合处理(SS+SI+SE)效果最佳,与SS处理相比,其Na含量显著降低62.07%。此外,相关分析结果表明N、K、Mg含量与光合生理指标存在明显的正相关关系,Na含量与光合生理指标呈负相关。综上,盐胁迫下Si、Se可通过促进叶片养分吸收、改善光合代谢效率从而缓解小麦盐胁迫,以Si、Se组合施用处理效果最佳。

摘要：为阐明玉米中心蛋白(ZmCEN)的生物学功能,采用酵母双杂交技术对其互作蛋白进行研究。提取玉米(Zea mays L.)自交系‘郑58’幼苗的总RNA,利用SMART技术反转录合成ds cDNA,构建以pGBKT7为载体的酵母双杂交cDNA文库;依据ZmCEN基因的CDS序列设计引物,构建重组诱饵载体(pGBKT7-ZmCEN)转化酵母菌株Y2HGold,检测诱饵载体的毒性与自激活能力后,筛选与玉米中心蛋白(ZmCEN)互作的猎物蛋白。将筛选的互作蛋白NAC67和TONNEAU1b(TON1b)再次验证相互作用,并选取互作蛋白TON1b,采用BiFC实验分别构建ZmCEN-pSPYNE和TON1b-pSPYCE BiFC半分子重组载体,转化拟南芥原生质体,进一步验证它们在细胞内的互作;并利用Uniprot和KEGG在线网站对互作蛋白进行gene ontology(GO)注释分析。结果表明:玉米全株幼苗的cDNA文库库容量达到2.56×107 CFU,文库滴度5.36×108 CFU/mL,符合建库要求。经检测诱饵载体无毒性也无自激活功能,所筛选的cDNA文库经测序和Blast比对分析以及共转验证,最终得到28个与诱饵蛋白ZmCEN互作的蛋白质。GO注释显示互作蛋白参与的生物过程有21种。BiFC结果显示,蛋白TON1b与ZmCEN在拟南芥原生质体细胞内互作而形成互补,从而产生黄色荧光,进一步证实了两者存在互作关系。酵母双杂交系统cDNA文库的成功构建与筛选,为进一步研究玉米ZmCEN及其与互作蛋白的作用机制奠定了基础。

摘要：为提高内生生防菌吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007发酵产脂肪酶的能力,并确定该菌株脂肪酶的酶学性质,通过单因子试验和正交设计试验,优化该菌株产脂肪酶的发酵培养条件,初步考察了温度、pH、金属离子和有机溶剂对其活性的影响。结果显示:JK-SH007菌株产脂肪酶最优培养基组成及发酵条件为:葡萄糖15 g/L,蛋白胨20 g/L,K2HPO42.5 g/L,花生油400μL/50 mL,初始pH 8.0,发酵温度33℃。该脂肪酶反应最适温度为60℃,且在50~60℃条件下具有良好热稳定性;反应最适pH为8.0,在pH 5.0~10.0活性稳定;该脂肪酶对甲醇、乙醇、乙酸乙酯的耐受性好,具有较高甲醇抗性。研究结果表明,该酶对温度和pH均具有较宽的适应度,具有开发成生物催化剂的潜力。

摘要：目的:利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9)系统构建玉米中心蛋白(Centrin)的表达载体,经转化后分析其对玉米生长发育的影响。方法:针对ZmCen基因的第一个外显子设计sgRNA,将其连入pOMS01-Cas9-ZmCensgRNA表达载体,转化农杆菌GV3101后,侵染玉米自交系材料B104的愈伤组织,经继代、诱导、分化成苗,筛选出转基因后代。对T0代和T1代基因组DNA进行PCR验证、测序及表型分析。结果:成功构建ZmCen的表达载体。侵染农杆菌后,PCR测序显示,T0代和T1代突变率分别为20.13%和64.52%,其中T1代的纯合缺失突变率为5%。序列分析表明,ZmCen基因的编辑靶点附近发生了碱基的替换、插入或缺失。经与野生型表型比对发现,ZmCen突变体T1代植株出现发育缓慢且雄花序不完全发育表型,纯合突变体植株雄花序则完全不发育。结论:通过CRISPR/Cas9技术成功地对玉米ZmCen基因进行了编辑,ZmCen突变体的获得为玉米雄性器官发育相关基因的研究奠定了基础。

摘要：针对传统课堂教学形式单一从而影响学生学习积极性的问题,文章提出了细胞生物学实验线上线下混合式教学模式的改革与实践。依托学习通软件和细胞生物学实验室硬件,构建细胞生物学实验线上与线下平台。重新整合实验教学内容,更新实验技术,根据学生的反馈改进教学计划。采用SPOC教学方式,设计教学环节,完善细胞生物学实验教学考核评价方式,改善实验教学质量,通过革新细胞生物学实验线上线下混合式教学模式,有效提高学生综合素质。

摘要：以丹参叶片为外植体,将其接种在MS基本培养基上,探索不同激素种类和浓度配比对丹参愈伤组织诱导、愈伤组织分化为芽的影响。结果表明,MS+1.0mg/L6-BA+2.0mg/L2,4-D是丹参叶片诱导愈伤的最佳培养基;MS+2.0mg/L6-BA+0.25mg/LNAA是诱导愈伤组织分化为芽的最佳培养基。单独使用6-BA不利于诱导芽,与一定浓度的NAA配合使用能高效率地诱导芽。