摘要：利用正交试验设计L9(34)的方法,最终建立了北重楼ISSR-PCR的优化反应体系,即20μL反应体系中包含1×buffer,dNTP 175μmol.L-1,Prim er 0.8μmol.L-1,Mg2+1.4 mmol.L-,Taq酶2.5 U及模板DNA 80 ng。适宜的扩增程序为95℃预变性5 m in;94℃变性40 sec,55℃退火45 sec,72℃延伸90 sec,40个循环;72℃延伸7 m in,4℃保存。该优化体系的建立,将为北重楼及其近缘种的系统学和种质资源鉴定及遗传多样性的研究奠定基础。

摘要：利用正交试验设计法，从引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg^2＋浓度和dNTP浓度4种因素3个水平，对山茱萸ISSR—PCR反应体系进行优化分析，并在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测．结果表明，20弘LISSR—PCR反应体系中各因素的最佳浓度分别为：1×PC Rbuffer、150μmol／LdNTP、1．0μmaol／L引物、2．5mmol／L Mg^2＋和2．0U TaqDNA聚合酶，最佳模板DNA浓度为20-80ng，引物UBC835的最佳退火温度为57．2℃．