摘要：目的:优选白术总多糖的浸提工艺。方法:以总多糖质量分数为指标,采用均匀试验考察加水量、浸提时间和温度对提取工艺的影响。采用UV测定总多糖含量,检测波长491 nm。结果:最佳提取工艺参数为加8倍量水于90℃浸提60 min;白术水提液中总多糖质量分数6.20%。结论:优选的总多糖浸提工艺稳定可行,建立的含量测定方法准确可靠。

摘要：目的建立白花蛇舌草中齐墩果酸和熊果酸的高效液相测定方法,并采用正交设计法优化白花蛇舌草提取工艺。方法色谱柱:Aglient C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:乙腈-磷酸盐缓冲液pH=6.8(70∶30);检测波长:210 nm;流速:0.8 mL·min^(-1);柱温:25℃。结果齐墩果酸的线性范围在0.1624~1.2992μg,r=0.9992,平均回收率为102.22%,RSD为0.83%;熊果酸线性范围在0.3296~2.6368μg,r=0.9991,平均回收率为100.78%,RSD为0.46%。齐墩果酸和熊果酸平均加样回收率(n=9)分别为102.2%、100.7%,RSD均不大于1.2%。最佳提取工艺为乙醇浓度为90%,料液比1∶80,超声提取30 min,超声功率120 W。结论本实验方法操作简便,定量准确,重现性好,可用于白花蛇舌草药材中齐墩果酸、熊果酸的含量测定。

摘要：目的优化白花蛇舌草中总黄酮的提取工艺。方法在单因素试验基础上,以总黄酮为指标,根据Box-Benhnken中心组合设计原理,利用响应面分析法考察料液比、提取浓度、提取时间对白花蛇舌草总黄酮的影响。结果白花蛇舌草中总黄酮提取最佳工艺条件为乙醇浓度90%、料液比1:22、提取时间90min。结论通过响应面法优选的白花蛇舌草总黄酮提取工艺合理可行,可为该药材进一步研究提供实验依据。

摘要：根据已发表的弓形虫主要表面抗原Ｐ３０基因序列，自行设计合成一对寡核苷酸引物。利用ＰＣＲ技术获取Ｐ３０抗原基因整个开放阅读框架的碱基序列。ＰＣＲ产物经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切后，与经同样两种内切酶切割的质粒载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ连接构成重组质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ－Ｐ３０，转化大肠杆菌ＤＨ５α。通过遗传标记筛选、ＰＣＲ扩增及酶切分析对重组子进行了初步的鉴定，构建了弓形虫主要表面抗原Ｐ３０基因克隆，为进一步选择真核系统或原核系统体外表达该抗原，用于临床弓形虫病的免疫学诊断及弓形虫病的预防打下了必要的基础。

摘要：为构建弓形虫主要表面抗原ｐ３０基因重组质粒，根据已发表的弓形虫主要表面抗原ｐ３０基因序列，设计合成引物Ｐ１、Ｐ２。在两引物的５末端分别加上了ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ酶切位点，利用ＰＣＲ技术获取ｐ３０抗原基因整个开放阅读框架的碱基序列。ＰＣＲ产物经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切后，与经同样两种内切酶切割的质粒载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ连接构成重组质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ－ｐ３０，转化大肠肝菌ＤＨ５α。通过遗传标记筛选、ＰＣＲ扩增及酶切分析对重组子进行了鉴定证实构建了ｐ３０基因重组质粒。