摘要：采用正交设计法对温度、盐度和 pH值对生物膜转氨氮能力的影响进行考察。考虑到生物过滤器的一般工作环境 ,3个因子各取三水平 ,为了充分考虑交互作用 ,选用正交表L27(313)。结果表明 ,取值范围内盐度和 pH值对硝化细菌代谢的影响不明显 ,温度对硝化细菌的代谢有明显的影响 ,而且25℃组的氨氮去除率最高。

摘要：根据中国对虾蜕皮抑制激素的全长cDNA序列设计引物 ,以中国对虾基因组DNA为模板 ,采用PCR等技术分别得到 3个扩增产物 :NP1、NP2和NP3,长度分别是 5 4 0bp、6 0 1bp和 82 6bp。NP1和NP2均由 2个外显子和 1个内含子组成 ,NP3由 3个外显子和 2个内含子组成。序列分析表明 ,NP1、NP2和NP3是中国对虾Ⅱ型CHH家族神经肽的基因片段。NP1、NP2和NP3的外显子分别与斑节对虾的神经肽Pem SGP C2、Pem SGP C1及中国对虾FenchMIH的mRNA相似性最高 ,同源性分别为 91 5 %、92 8%、88 9%。由此可以推测NP3是中国对虾MIH的基因序列 。

摘要：于 2 0 0 0年 2月以中国科学院海洋研究所水族楼暂养的中国对虾为材料 ,采用常规方法从尾部肌肉中提取DNA ,构建小片段部分基因组文库。采用人工设计合成的 (CT) 7、(AT) 7重复片段作引物 ,利用PCR法对中国对虾小片段部分基因组文库进行筛选。本实验首次在中国对虾中获得 31个微卫星序列 ,分别分布于 1 8个阳性重组克隆中 ,其中perfect共2 3个 ,占 74% ,imperfect2个 ,占 7% ,compoundperfect 1个 ,占 3% ,compoundimperfect 5个 ,占 1 6%。结果还表明 ,在中国对虾基因组DNA中 ,(CT) n、(AT) n 形式的微卫星序列的含量非常丰富。

摘要：使用RepeatMasker软件在栉孔扇贝的 6 935条ESTs中发现了 4 2条微卫星序列。选取其中的 7个序列 ,根据微卫星位点的旁侧序列设计引物 ,并对设计出的引物在中国、日本、韩国野生群体中进行多态性检测 ,发现有 6对引物能产生扩增产物 ,其中有 3对引物可望在以后的群体分析及连锁图谱的构建中加以应用。该结果初步证实了在栉孔扇贝的ESTs序列中存在微卫星位点 ,从而为扇贝生物中微卫星标记的筛选开辟了新的途径。

摘要：利用半定量RT-PCR方法 ,根据中国对虾(Fenneropenaeuschinensis)抗菌肽的cDNA序列 ,设计一对特异引物 ,首次对中国对虾养殖期 (PL11期仔虾～稚虾 )抗菌肽的表达进行了研究。结果在各时期样本所提取的总RNA中 ,均扩增出一条长度约为200bp的特异性条带 ,表明中国对虾养殖期不同阶段均有抗菌肽的表达 ,提示中国对虾抗菌肽基因为组成型表达 ,并可能是中国对虾抵抗微生物感染的一个重要分子基础。

摘要：于 2 0 0 0年 3月提取中华绒螯蟹眼柄总RNA ,以此为模板 ,根据日本对虾的神经肽Pej SG Ⅳ设计兼并引物 ,进行RT PCR扩增 ,在适宜的反应条件下 ,获得一特异性的产物 ,将该片段克隆到载体中进行测序。结果表明 ,中华绒螯蟹特异性cDNA片段由 2 1 3个碱基组成。在生物信息数据库中查找由该cDNA推定的氨基酸序列的相似序列 ,可以发现有大量甲壳动物的CHH家族神经肽与它相似。在所有相似序列中 ,甲壳动物的蜕皮抑制激素 (MIH)与它的相似度最高 ,这一结果提示由中华绒螯蟹的眼柄特异性cDNA片段推定的氨基酸序列可能是它的MIH片段。

摘要：以虾夷马粪海胆(Strongylocentrotus intermedius)为亲本,采用不平衡巢式设计方法和人工授精技术,每个雄性海胆配 5个雌性海胆,每个雌性个体产生若干幼体,构成了11个父系半同胞家系和35个母系全同胞家系,分别测定了每个母系孵化后生长到3月龄和5月龄的全同胞幼海胆40～50个后代的体重和壳径,应用数量遗传学原理和半同胞组内相关分析法研究了虾夷马粪海胆早期生长发育性状的遗传力。结果表明,3月龄和5月龄的海胆体重的狭义遗传力估计值为0.339～0.523,壳径的狭义遗传力估计值为0.316～0.487。分析结果显示,雌性遗传方差组分均显著大于雄性遗传方差组分,雌性遗传方差组分存在显著的母性效应,表明由雄性遗传方差组分估计的遗传力准确可靠,父系半同胞组内相关法计算的狭义遗传力是遗传力的无偏估计值。

摘要：中国对虾素是从中国对虾血细胞中克隆得到的一种抗菌肽。为了进一步研究中国对虾素(CHP)的功能并为制备特异性抗体作准备,采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,进行了对虾素原核表达的研究。根据从中国对虾血细胞中克隆得到的对虾素基因设计特异性引物扩增中国对虾素成熟肽基因(Chp),插入原核表达载体pGEX4T1中,在***21表达融合蛋白GSTCHP。结果表明,不同表达菌株的融合蛋白表达量为30%—34%,同一菌株在诱导5h后能达到最高表达量。利用GST亲和层析纯化融合蛋白,将融合蛋白用凝血酶裂解以得到CHP,其分子量约为5.6kDa,N端测序结果与期望的成熟对虾肽序列一致。用液体生长抑制方法检测活性,表明重组GSTCHP蛋白及CHP均表现出对大肠杆菌的抑菌活性。

摘要：根据中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)EST序列信息设计引物，用RT-PCR方法，从经热休克处理的中国明对虾的肝胰腺RNA中克隆到长2090bp的hsc70 cDNA序列，包括长1956bp的完整编码序列(complete CDS)及部分5’端和3’端非翻译区(5’UTR和3’UTR)．PCR及测序结果分析显示，hsc70cDNA的1-547bp碱基所对应的基因组序列可能含有内含子，548～2090bp碱基所对应的基因组序列不含内含子．根据编码序列推导出相应的652个氨基酸，与其他真核生物HSP70家族成员进行同源性比较．发现中国明对虾HSC70与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)HSC71，人(Homo sapiens)HSC70，家鼠(Mus musculus)HSP70，烟草天蛾(Manduca sexta)HSC70的相似性分别是85．9％，85．9％，85．8％，85．4％，表现出较高的保守性．表达分析显示，hsc70 mRNA在中国明对虾正常肝胰腺、肌肉、眼柄、血细胞、心脏、卵巢、肠和鳃等组织存在，并呈组成性表达；受到整体热休克后的对虾肌肉组织hsc70 mRNA水平(以β-actin mRNA水平为内标)与对照组没有显著的差异．

摘要：尝试了多种方法分离中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)囊胚细胞和原肠胚细胞并进行了细胞培养。结果表明,解剖法适用于囊胚细胞,自行设计的压片法适用于原肠胚细胞。在培养起始阶段,通过降低血清浓度和缩小培养体系可使中国明对虾囊胚细胞和原肠胚细胞迅速贴壁并铺展,囊胚细胞铺展后有明显的生长晕,中后期原肠胚细胞较易达到半汇聚状态。值得注意的是,中国明对虾囊胚细胞在不同培养液中培养可发生形态上的分化。本实验方法有望用于对虾细胞分化机理和对虾细胞建系的研究。