摘要：为建立适合蓝花丹的ISSR-PCR反应体系,本研究以蓝花丹为供试材料,结合L_(16)(4~5)正交试验和单因素试验设计对影响蓝花丹ISSR-PCR反应体系的5个因素(dNTPs, Mg^(2+),模板, Taq酶,引物)进行优化,并在最优反应体系的基础之上进行了引物及其最佳退火温度的筛选。结果表明,5个影响因素中,Mg^(2+)对扩增反应的影响最大;不同退火温度对扩增效果具有显著的影响,但将退火温度设置为55℃时,大部分的引物都能扩增出清晰的条带。最终建立的蓝花丹ISSR-PCR反应体系为:总体积25μL,其中含Taq酶1 U,模板DNA 100 ng,dNTPs 0.15 mmol/L,引物0.4μmol/L,Mg^(2+)0.5 mmol/L,10×Buffer 2μL。研究结果为蓝花丹及其近缘种的遗传多样性研究以及遗传图谱的构建提供分子标记水平上的依据。

摘要：【目的】了解复合型大气污染对儿童呼吸道的急性影响。【方法】采用定组研究设计,在上海市徐汇区、虹口区各选择1所小学(A、B),随机抽取四年级5个班级的学生开展肺功能和呼出气一氧化氮(FeNO)的测定,前3次检测开展于2020年5—6月,第4次肺功能检测开展于2021年9—12月。同时收集同期2所学校就近空气质量监测点细颗粒物(PM_(2.5))、可吸入颗粒物(PM_(10))、SO_(2)、NO_(2)、O_(3)、CO大气污染物的日均值和小时均值,收集同期气象监测资料(温度、湿度、风速、大气压)。采用线性混合效应模型分析夏季大气污染对肺功能指标和呼吸道炎症改变指标的影响。【结果】单污染物模型结果显示,PM_(2.5)、PM10、SO_(2)和NO_(2)与FeNO呈正相关,效应体现在滞后0~3日(lag0~lag3)(均P<0.05),PM_(2.5)、PM_(10)和NO_(2)与肺功能最大呼气流量(PEF)、用力呼气流量25%的呼气流速(FEF_(25%))、FEF_(50%)、FEF_(75%)、FEF_(25%~75%)、用力呼气量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)和FEV1/FVC改变呈负相关,效应体现在lag0~lag3(均P<0.05)。双污染物模型结果显示,O_(3)、PM_(2.5)分别与SO_(2)和NO_(2)组合时,SO_(2)、NO_(2)浓度变化与FEV1的降低显著相关(均P<0.01),PM_(2.5)分别与O_(3)、SO_(2)、NO_(2)组合时,PM_(2.5)浓度变化,与FeNO的上升显著相关(均P<0.01),且效应值大于PM_(2.5)的单污染物模型。【结论】夏季不同大气污染物与儿童呼吸道功能指标的健康效应表现不同。双污染物联合作用分析显示,污染物对儿童肺功能的效应有不同程度的升高。夏季大气污染虽然较轻,但对儿童呼吸道功能指标和炎症指标依然有影响,且双污染物联合作用较单一污染物效应更显著。