摘要：目的:探讨通阳活血方熏洗治疗血栓闭塞性脉管炎(TAO)的临床疗效。方法:选取早中期TAO患者64例,随机分为观察组和对照组各32例,对照组给予常规西药治疗(前列地尔、阿司匹林肠溶片),观察组在对照组基础上加用通阳活血方熏洗治疗,两组均治疗2个月;治疗前后分别观察两组踝肱指数(ABI)、间歇性跛行、疼痛改善情况及血清白介素-6(IL-6)、血栓素B2(TXB2)水平,并作统计学分析。结果:治疗后两组ABI、间歇性跛行、疼痛评分均较治疗前改善,但观察组的ABI、间歇性跛行、疼痛评分改善显著,差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗后血清IL-6、TXB2水平均有改善,观察组治疗后血清IL-6、TXB2水平低于对照组(P<0.05),有显著性差异。结论:通阳活血方熏洗联合西药常规治疗早中期TAO可明显改善患者间歇性跛行、疼痛的症状,提高ABI指数,改善患者血清IL-6、TXB2水平,疗效较单纯西药明显。

摘要：采用活性单元拼接的方法,以新型吡唑酰胺类杀螨剂吡螨胺为先导结构,在吡唑酰胺分子结构中引入取代噁唑活性单元,设计合成出15个结构新颖的含取代噁唑环的吡唑酰胺类衍生物.目标化合物的结构通过1H NMR,13C NMR和元素分析等进行了表征.初步室内杀虫活性测试结果表明,在500μg/m L测试浓度下,多数目标化合物对粘虫(Orientalarmyworm)有着较高的杀虫活性(致死率≥90%).其中1个目标化合物在500μg/m L测试浓度下对蚜虫(Aphis medicaginis)的致死率达100%.此外,2个目标化合物在500μg/m L测试浓度下对朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)的致死率都为30%.

摘要：目的:建立特异、敏感、快速检测西尼罗河病毒(WNV)的SYBR Green实时荧光定量PCR方法。方法:针对西尼罗河病毒囊膜蛋白(E)的保守序列设计引物,建立WNV的实时荧光定量检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性以及稳定性。对保存的54例WNV感染者的血清样本进行检测,分析其检测的准确性。结果:建立的SYBR Green实时荧光定量PCR方法对WNV的检测具有高度的特异性,而对日本脑炎病毒(JEV)、圣路易斯脑炎病毒(SLEV)等均无交叉反应,检测的灵敏度可达到100pg。标准曲线具有较好的线性关系,相关系数为0.995,实时荧光定量PCR效率为100%。对54例WNV感染样本进行检测,准确率高达98.15%。结论:实时荧光定量PCR技术检测WNV具有较高的特异性、敏感性和稳定性,可作为临床诊断WNV的手段。

摘要：目的:利用荧光定量PCR技术,建立一种快速、敏感、特异的检测产气荚膜梭菌的方法,及时用于指导临床治疗。方法:以产气荚膜梭菌16srRNA基因作为靶序列,设计一对特异引物和探针,以伤口分泌物和脓液提取的核酸作为模板,利用已经优化的引物和探针进行PCR反应;同时与细菌培养作比较,验证此方法的快速性、敏感性及特异性。结果:建立的反应体系在上游引物浓度为0.45μmol/L,下游引物浓度为0.15μmol/L,探针浓度为0.3μmol/L时,具有很好的敏感性,与21种其他细菌均无交叉反应,其敏感性为9cfu/反应体系。荧光定量PCR检测结果与细菌培养结果完全一致。结论:所建立的荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,能对产气荚膜梭菌感染做出准确的检测报告,具有对战时高发疾病气性坏疽进行快速和定量检测潜质。

摘要：目的利用荧光定量PCR技术,建立快速敏感特异的产气荚膜梭菌检测方法。方法以产气荚膜梭菌基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以产气荚膜梭菌菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比,同时验证方法的灵敏度、特异性、重复性。结果反应体系在上、下游引物浓度均为1μmol/L,探针浓度为0.1μmol/L时,具有良好的特异性和灵敏度,与创伤弧菌等24种相关细菌均无交叉反应,对纯菌检测的灵敏度为9×102CFU/ml,重复性试验证实该体系重复性好,稳定性高;3例临床样本检测结果与细菌培养结果相符。结论建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,能对临床气性坏疽做出快速准确的报告,实现对气性坏疽战时高发性疾病安全、快速和定量检测。

摘要：目的:探讨实时定量PCR检测肺炎衣原体(chlamydia pneumonia,Cpn)的方法。方法:根据GenBank提供的肺炎衣原体基因序列,选取高特异性和保守型的区域进行引物设计,并建立实时定量PCR(real-timePCR,RT-PCR)的检测方法。同时用肺炎支原体、肺炎双球菌、流感病毒、副流感病毒以及腺病毒对Cpn引物的特异性进行分析。对呼吸道感染患者200个咽拭子样本和68个肺泡冲洗液样本进行检测,以荧光抗体检测法作对照,评价实时定量PCR检测Cpn的准确性。结果:Cpn PCR引物对肺炎支原体、肺炎双球菌、流感病毒、副流感病毒以及腺病毒均显示阴性,对Cpn显示为阳性,特异性良好;荧光实时定量PCR技术检测的准确性优于荧光抗体检测法。结论:荧光实时定量PCR技术检测Cpn体灵敏度高、周期短,可作为临床诊断Cpn的手段。

摘要：目的建立检测创伤伤口分泌物中产气荚膜梭菌的实时荧光定量PCR方法,为气性坏疽的早期快速诊断提供新手段。方法以产气荚膜梭菌16SrDNA基因序列为模板,在其保守区域设计特异性引物及探针,以PCR扩增产物重组质粒作为定量检测的标准品,绘制标准曲线。对荧光定量PCR体系和反应条件进行优化,并验证方法的特异性、敏感性、重复性及临床应用的可行性。结果所建立方法检测产气荚膜梭菌具有高度特异性,与创伤弧菌等23种相关细菌均无交叉反应。检测灵敏度以纯菌计达9×102cfu/ml,相当于9cfu/反应。反应体系具有很高的稳定性。整个操作过程仅需3h。5例创伤可疑分泌物样本的荧光定量PCR检测结果与细菌培养完全一致。结论本研究建立的实时荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,可用于创伤伤口分泌物中产气荚膜梭菌的日常检测以及战时和突发事件时的批量应急诊断。

摘要：目的:利用荧光定量PCR技术,建立快速敏感特异的检测产气荚膜梭菌的方法。方法:以产气荚膜梭菌基因为靶序列设计引物和探针,以自产气荚膜梭菌菌株中提取的DNA为模板,优化引物和探针的浓度比,同时验证方法的特异性、敏感性。结果:建立的反应体系在上游引物浓度为0.45μmol/L、下游引物浓度为0.15μmol/L、探针浓度为0.3μmol/L时,具有良好的特异性和敏感性,与创伤弧菌等12种相关细菌均无交叉反应;对纯菌检测的灵敏度低于10 CFU/反应体系。结论:建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,能对战时气性坏疽做出快速准确的报告,实现对这种战时高发疾病的安全、快速和定量检测。

摘要：目的:运用实时荧光定量PCR法检测产气荚膜梭菌,为早期快速诊断气性坏疽提供新方法。方法:以产气荚膜梭菌16s rDNA基因序列为模板,在其保守区域设计特异性引物与探针,将PCR扩增所得产物片段克隆,作为定量检测的标准品,绘制标准曲线。并对荧光定量PCR体系与反应条件进行优化,验证方法的特异性、敏感性、重复性及可行性。结果:实时荧光定量PCR法对产气荚膜梭菌的检测具有高度特异性,与创伤弧菌等24种相关细菌等均无交叉反应;检测灵敏度以纯菌计数达9×102cfu/mL,相当于9 cfu/反应;反应体系有较高稳定性;整个操作过程仅需3 h;300例创伤可疑分泌物样本的荧光定量PCR检测结果与细菌培养结果一致。结论:实时荧光定量PCR法特异、灵敏、快速,适用于产气荚膜梭菌的临床检测及突发事件的批量检测。