摘要：背景:急性心肌缺血时c-JunN末端蛋白激酶(c-JunN-terminalproteinkinase,JNK)被激活,并使得缺血损伤加重。慢性冬眠心肌组织中JNK的亚型———JNK1/2是否被激活及其在慢性冬眠心肌发生发展机制中的作用又是什么呢?目的:明确慢性冬眠心肌组织中JNK1/2的蛋白表达及其磷酸化(p-JNK1/2)的变化。设计:随机对照的实验研究。单位:徐州医学院附属医院心血管病研究所。材料和方法:在徐州医学院附属医院导管室进行动物模型的制备、在徐州医学院生化教研室测定JNK1/2的蛋白表达及其磷酸化(p-JNK1/2)的变化。将14只小型中国家猪随机分为实验组(n=8)与对照组(n=6)。实验组以右冠状动脉为靶血管,经右股动脉送入自制的缩窄器,制备成慢性冬眠心肌及心肌梗死的模型。获取对照组心肌组织、实验组中的正常心肌组织及慢性冬眠心肌组织的样本进行光镜、电镜检查并采用免疫印迹(Westernblotting)分析3组心肌组织的JNK1/2的蛋白表达及其磷酸化的变化。主要观察指标:慢性冬眠心肌组织中JNK1/2是否被活化。结果:实验组慢性冬眠心肌组织p-JNK1/2比实验组正常心肌组织、对照组心肌组织高。对照组、实验组正常心肌组织、实验组慢性冬眠心肌组织p-JNK1/2的免疫活性分别为1,1.42±0.52,2.6±0.59。

摘要：背景:在多种移植细胞中,成体自身骨髓单个核细胞以其取材简便、无排异反应、无伦理学争议等优势成为具有临床应用价值的细胞来源。干细胞移植后,如何从受体辨别供体细胞,并观察其在受体中的生存状况,一直是让人困扰的问题。目的:应用超顺磁性氧化铁颗粒标记小型家猪骨髓单个核细胞,观察磁共振成像示踪磁探针标记细胞的可行性。设计:对照观察实验。单位:东南大学附属中大医院心血管病研究所。材料:实验于2006-04/2006-08在东南大学心血管病研究所完成。健康中国小型雄性家猪,三四月龄,体质量20～30kg,由东南大学实验动物中心提供(SYXK(苏)2002-0012)。方法:分离培养小型家猪自体骨髓单个核细胞,采用超顺磁氧化铁颗粒对骨髓单个核细胞分离当日细胞悬液中进行标记,普鲁士蓝染色显示细胞内铁,台盼蓝拒染法评估细胞活力。将11只用于心肌梗死模型制备的猪分为实验组9只和对照组2只。选择经皮行左或右颈动脉或股动脉穿刺途径,以1.5～2.0mm球囊封堵左前降支下1/3,304～405kPa,持续封堵60min后,术前反复予缺血预适应三四次。由猪体表心电图证实心肌梗死模型成功后,经皮冠脉内骨髓单个核细胞输注:梗死模型建立24h后,经皮股动脉穿刺行冠脉造影,应用OTW导管冠脉内输注骨髓单个核细胞细胞悬液,然后将盛放细胞的注射器及OTW导管以肝素生理盐水冲洗注入残余细胞,注射时间10min,对照组2只猪经同样方法注入未标记细胞。术后磁共振活体示踪骨髓单个核细胞并与心肌组织切片普鲁士蓝染色对照。结果:实验组7只和对照组1只小型家猪进入结果分析,两组各1只死于心肌梗死模型制备,实验组1只死于磁共振检查前麻醉意外。①骨髓单个核细胞的超顺磁氧化铁颗粒标记率近100%,在含Fe2O3-多聚左旋赖氨酸的培养基中骨髓单个核细胞可继续增殖,细胞形态无明显变化。②8只心肌梗死模型中,5只标记细胞移植后T2*WI序列心肌梗死周边见模糊的低信号区,4周后低回声信号均消失,离体T2*WI序列示梗死区周边一个呈点状分布的低信号区。③组织学检查发现5只(细胞数106以上)普鲁士蓝细胞阳性,分布部位与磁共振信号减低区一致。结论:超顺磁氧化铁颗粒标记骨髓单个核细胞安全、有效;T2*WI对磁标记骨髓单个核细胞的示踪最敏感;磁共振可对经冠脉途径植入的磁标记的干细胞进行活体示踪,磁共振信号改变与干细胞数目及分裂增殖状态相关。