摘要：目的：克隆和鉴定细粒棘球蚴的Eg G1Y162基因,分析其蛋白表达和适应性进化并鉴定抗原性。方法：根据em Y162基因序列设计引物,分别从细粒棘球绦虫原头蚴、囊壁生发层、成虫和虫卵四个发育阶段,提取基因组DNA和总RNA,mRNA反转录为c DNA,利用PCR的方法以基因组DNA和c DNA为模板扩增Eg G1Y162基因;构建PUCm-T/Eg G1Y162重组质粒,经PCR、酶切及测序鉴定后,测序确定其正确性。利用DNAman软件与MEGA4软件对Eg G1Y162基因特点进行分析并构建Eg G1Y162核酸序列的进化树进一步探讨其同源性。荧光定量PCR检测Eg G1Y162基因在细粒棘球绦虫原头蚴、囊壁生发层、成虫和虫卵四个不同发育阶段的表达情况。利用定向克隆技术将Eg G1Y162抗原基因片段克隆至原核表达质粒PET-41a上,通过酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序确定序列。IPTG初步诱导和表达Eg G1Y162-GST重组蛋白,通过SDS-PAGE电泳和Western blot试验分析鉴定。结果：从细粒棘球绦虫的两个不同发育阶段均克隆出Eg G1Y162基因,从总DNA克隆得到片段长度1 680bp,从c DNA克隆得到片段长度459bp。相似性比较表明,Eg G1Y162基因序列与em Y162相似性为91%,而Eg G1Y162基因c DNA与em Y162相似性为95%。进一步分析显示,Eg G1Y162基因序列由3个外显子和2个内含子组成,外显子区域分别为1～70,1 064～1 380和1 577～1 648。位于疏水端1～16位氨基酸构成Eg G1Y162信号肽序列,35～115位氨基酸形成一个大的纤黏连蛋白剪接体FN3,133～152位氨基酸构成羧基端跨膜区域。测序结果显示Eg G1Y162抗原基因长度为360bp,编码120个氨基酸。通过荧光定量PCR检测,发现Eg G1Y162在成虫、生发层阶段、原头蚴和虫卵阶段均有不同程度的表达。但是Eg G1Y162在成虫中的表达量最多,相对值为19.526,差异有统计学意义（P〈0.01）,其次生发层阶段,为5.122,再次在原头蚴阶段,相对值为5.083,而在虫卵阶段最少,为1.6588。构建的PET-41a/Eg G1Y162原核表达质粒,经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测表明Eg G1Y162-GST重组蛋白得到成功表达,在相对分子量为44k Da处有表达条带。Western blot分析显示阳性印迹条带,分子量为44k Da,Eg G1Y162重组蛋白能与细粒棘球蚴感染40天后犬的血清发生反应;与包虫病患者血清也有阳性反应。结论：成功克隆Eg G1Y162抗原基因,序列对比分析显示Eg G1Y162的c DNA与em Y162的c DNA具有很高的相似性,基因的差异性主要存在于内含子区域,Eg G1Y162抗原基因是一种新的基因。Eg G1Y162在成虫中的表达量最多。成功诱导表达出Eg G1Y162重组蛋白,并且Eg G1Y162重组蛋白具有很好的抗原性。

摘要：目的了新疆某三甲综合性医院门诊患者满意度情况,探讨影响门诊患者满意度的主要因素,改进医院门诊服务质量。方法随机对2014年3月-2015年5月1300名18-69岁的门诊患者采用自行设计的问卷调查表进行调查,调查内容包括患者人口学特征、患者对就诊环境、就诊流程及医疗服务等4个方面内容满意度,采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析。结果门诊患者总体满意度为(4.00±1.00),其中对环境的满意度为(4.12±0.93),对流程的满意度为(3.97±1.00),对医疗服务的满意度为(4.07±0.94)。结论我医院应做好医疗资源配置规划,优化流程,缩短患者候诊时间,提高各个环节服务质量。

摘要：目的分析新疆某医学院校护理专业实习生职业精神现状及影响因素。方法2017年3月。自行设计实习护生职业精神影响因素问卷，内容包括基本信息、专业实习生职业精神影响因素及护理专业实习生职业精神态度现状三部分31个条目；对新疆某医学院校328名实习期护理专业学生进行调查。收回并核查有效问卷表325份，有效回收率99．09％。采用EpiData 3．0建立数据库，应用SPSS 17．0行多元回归分析。结果职业精神态度现状统计结果显示，“我希望向优秀的护理老师学习”“我一直期望通过我的护理帮助病人减轻痛苦”“良好的职业精神是优秀护士的必要条件”“我认为护理人员是医学界不可缺少的专业人员”百分率分别为95．08％、94．15％、94．15％、93．85％。多元回归分析显示，“在学校是否担任班干部”“选择护理专业的原因”“毕业后就业打算”三项数据有统计学意义（P〈0．05）。结论“在学校是否担任班干部”“选择护理专业的原因”“毕业后就业打算”可能是护理专业实习学生职业精神的主要影响因素。这说明在护理专业教育中可以着重培养学生的爱岗敬业精神，重视培养学生的组织能力，鼓励学生担任干部职务。以增强学生职业精神。