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高分辨率熔解曲线在CRISPR基因编辑检测和基因型鉴定中的应用: 收藏
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引用; 《同济大学学报（医学版）》2018年第4期39卷 17-21页; 作者：贺文吴婉婉陆平薛志刚盛哲津祝献民同济大学医学院上海200092 同济大学生命科学与技术学院上海200092; 目的建立一种基于PCR和在线高分辨率熔解曲线(high-resolution melting curve,HRM)分析工具的检测方法,实现对DNA序列微小差异的快速检测。方法在CRISPR基因编辑检测和基因型鉴定中,采用两步PCR,分别对目的片段进行扩增和富集,并通过免...; 目的建立一种基于PCR和在线高分辨率熔解曲线(high-resolution melting curve,HRM)分析工具的检测方法,实现对DNA序列微小差异的快速检测。方法在CRISPR基因编辑检测和基因型鉴定中,采用两步PCR,分别对目的片段进行扩增和富集,并通过免费在线软件对HRM进行分析。结果 HRM分析结果显示,本实验所设计的CRISPR慢病毒系统未能对COS7细胞中的RPE65基因进行有效的基因编辑;而在瘦素突变大鼠的子代基因型中,HRM可以明显区分杂合子和纯合子。结论 HRM能够快速鉴定CRISPR编辑和区分基因型。; 来源：详细信息评论

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