摘要：模式是软件开发中现存的、成熟的软件设计经验的提炼.模式包含体系结构模式和设计模式.针对一个典型的三维图形系统,本文从其架构设计到详细设计和具体实现整个过程,说明了模式是如何选取和应用的,分析了模式应用给系统带来的优势.系统纵向体系结构划分采用了层模式,并以MVC模式实现了交互层;在系统具体实现时几乎覆盖所有设计模式.通过对系统的分析,给出了一个具有一定参考意义的、基于模式进行系统设计的完整过程.

摘要：为了建立快速、敏感的犬副流感病毒（CPIV）核酸检测方法,针对CPIV的N基因的保守区设计4条识别靶序列上6个位点的特异性引物,进行CPIV的RT-LAMP反应。经优化反应条件,在链置换聚合酶的作用下,63℃扩增45 min获得结果,可通过核酸显色和琼脂糖凝胶电泳对结果进行判定。该方法具有较高的特异性和敏感性,可检测到1×10^1个拷贝数。CPIV的RT-LAMP方法方便于临床实践中犬副流感的快速检测与诊断。

摘要：根据NCBI上登录的犬瘟热病毒序列,设计了1对检测引物,对武汉临床宠物犬的口、鼻、肛门棉拭子样品进行了检测。随机取其中的6份阳性病料,对其血凝素蛋白编码基因进行扩增并测序。序列分析显示,病毒分为野毒和疫苗毒两簇,野毒的分型和地理位置关系密切。预测蛋白序列分析显示,此次分离的毒株与疫苗毒潜在的N连接糖基化位点有很大差异,可能是病毒抗原性变化的原因之一。根据序列分析结果进行了限制性片段长度多态性分析,并初步建立了野毒和疫苗毒的鉴别诊断方法。

摘要：河南某地区牛场部分牛出现呼吸道症状,伴随有怀孕母牛的流产,本研究使用细胞培养的方法于病死牛脾脏中分离得到1株BVDV病毒,命名为BVDV-HEN01。该病毒在MDBK细胞上生长,未发生固缩、拉网等病变,可确定该毒株为1株非致细胞病变毒株;下载若干条BVDV全基因序列,经MegaAlign软件比对在同源性较高的区域设计全基因组扩增引物10对,经鉴定该毒株为BVDV-2型毒株,并扩增出该毒株的全基因组;直接免疫荧光法测得病毒TCID_(50)为10^(-4.1)/0.1 mL。使用电镜观察病毒颗粒,颗粒的直径为50 nm左右。对分离株进行同源性分析并绘制系统进化树,发现HEN01株与我国SD1301株进化关系密切。本实验所分离的毒株为1株新的BVDV-2b亚型毒株,全基因组序列测定的完成对于反向遗传工程与疫苗的研发有重大意义。

摘要：建立一种同时检测貂肠炎病毒(MEV)、貂阿留申病毒(ADV)和犬腺病毒(CAV)的多重PCR诊断方法。引用已有的CAV引物,并根据GenBank发表的MEV、ADV序列保守区域设计特异性引物进行PCR扩增,可同时得到扩增长度为795(MEV)、451(ADV)、1 019 bp(CAV)3条特异性片段,对猪细小病毒(PPV),犬瘟热病毒(CDV)进行PCR检测结果为阴性。各种模板、引物之间相互不构成干扰。敏感性试验证明,可以检测到模板中MEV101.5TCID50和CAV100.5TCID50的病毒含量,对ADV检测的敏感性更高。

摘要：为建立一种用于检测胞内劳森菌的检测方法,本试验根据GenBank中公布的胞内劳森菌16SrRNA设计引物建立PCR诊断方法。结果显示:获得了大小为481bp的PCR产物,核苷酸序列同源性分析结果均为99%以上;特异性试验表明该方法对大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、猪流行性腹泻病毒和金黄色葡萄球菌均为扩增阴性;敏感性试验表明该方法的最低检出量为32.8μg/L;对20份临床样品阳性检出率为15%。结果表明:该方法具有较好的特异性和敏感性,适用于临床检测胞内劳森菌。

摘要：为研究犬人工感染犬瘟热病毒(CDV)后病毒在血清和粪便中的含量及变化,本实验根据CDV核衣壳蛋白(NP)基因序列设计一对特异引物,扩增NP基因。并以NP基因重组质粒作为阳性标准品,建立检测CDV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法。结果表明,该方法 102拷贝～109拷贝范围内具有良好的线性关系,相关系数为R2=0.998,扩增效率为E=98.3%,敏感度高,最低检测限为6.1拷贝/μL,重复性检测变异系数低于2.62%。该方法与常规RT-PCR方法比较,其敏感性提高102倍。两只人工感染CDV PS强毒株的犬,分别于接种后17 d、19 d发病死亡,采用荧光定量RT-PCR方法对人工感染犬的血液和拭子液中的病毒核酸载量进行定量检测以及对收集的22份临床样本拭子液进行检测,均检测到CDV。本研究结果表明,该方法可以用于CDV核酸定量检测,为该病毒的致病机理及病毒传播途径的研究提供了一种快速和敏感的检测手段。

摘要：根据犬瘟热病毒(CDV)弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计了套式引物,建立了RT-nested PCR检测方法。特异性试验表明,该法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬冠状病毒(CCV),DNA病毒犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)及正常Vero细胞中均不能扩增出条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增到10-9稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。用RT-nested PCR法检测了2006年我国东北地区临床表现犬瘟热症状的病例19例,检出率达90%,明显高于RT-PCR的检出率(45%)。部分病例扩增片段的测序结果表明,CDV NP基因出现个别碱基变异。研究结果表明,建立的犬瘟热病毒RT-nested PCR方法敏感、特异,适用于动物犬瘟热的快速诊断。

摘要：参考GenBank中已登录的CPV-SC-JM VP2基因序列设计引物,选用β-actin作为内参基因,利用SYBR GreenⅠ实时定量PCR相对定量法,对规模化毛皮动物场的12份粪便样品和5份血液样品进行检测。常规PCR方法检出14份,检出率82%,荧光定量PCR相对定量方法检出17份,检出率100%;粪便中病毒含量明显高于血液中病毒含量,最高可达7000倍;不同毛皮动物粪便样品中病毒含量也存在较大差异。

摘要：根据热传导的偏微分方程由变分原理导出稳态温度场的基本方程和边界条件,通过有限元法可以得到通用有限元计算方程。因此,采用八节点六面体等参数单元给出稳态温度场问题的单元刚度矩阵和边界热流向量的计算公式,并用VC++编程语言采用面向对象的技术编写了相应的计算程序。通过与AN-SYS分析结果进行对比,有效地论证了该程序的可行性。