摘要：参照GenBank中布氏杆菌的全基因组序列,设计一对特异性引物,通过PCR方法,扩增了8株来自3个布氏杆菌种的布氏杆菌表面蛋白31(BCSP31)全基因。PCR产物经克隆和序列分析后发现,该基因非常保守,8株不同菌株间的同源性高于99.3%;进化关系分析显示,5株中国来源的菌株(S2,M5,M111,M28,A387)显示了最近的同源关系,其中2个弱毒菌株S2和M5的BCSP31基因序列100%同源。3株外国来源的菌株(S19,2308,Rev.1)中,S19和2308同源性为100%。Rev.1与其他7株布氏杆菌BCSP31基因均有较大的差异。序列分析结果表明,BCSP31基因序列差异与布氏杆菌的种属和毒力无相关性。

摘要：为建立一种有效检测肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)的荧光定量PCR检测方法,根据EPEC的eaeA基因序列设计了特异性引物和探针,对引物和探针的最佳浓度分别进行了优化,并研究了其敏感性、特异性和重复性。同时,应用该方法对临床兔粪样品进行了检测,并与国家标准推荐方法进行了比较。结果显示:本研究建立的EPEC荧光定量PCR检测方法检测阳性质粒的最低检测限为2.97拷贝/μL,批内重复和批间重复试验的变异系数均低于3%,临床样品的阳性检出数量高于国标推荐方法。结果表明,该方法特异性良好、敏感性高、重复性理想,能够准确检出兔粪球样本中的EPEC核酸,具有较好的应用前景。

摘要：微生物实验室是进行微生物学研究的重要场所,其建设、使用、运维旨在保护研究人员、环境和社会公众免受潜在生物危害的影响。随着《中华人民共和国生物安全法》的颁布实施,微生物实验室的生物安全管理越来越受到各方重视。在实验室活动中,病原外溢风险是一个备受关注的问题,其重要性不可忽视。围绕微生物实验室常见实验活动,通过存在病原外溢风险的案例分析及风险警示,从实验室设计和建造、实验室安全设施、个人防护和规范操作、废弃物处理和实验器材管理、实验室风险评估、环境监测和应急预案几个方面进行探讨,为有效避免微生物实验室病原外溢提供参考。