摘要：目的 探讨西安地区食管癌与吸烟、CYP1A1、GSTM1基因型的关系。方法 采用病例－对照设计的分子流行病学研究方法，研究吸烟史、CYP1A1、GSTM1基因型与食管癌的关系。结果 吸烟为食管癌的危险因素（OR＝1.97,95%CI=1.12-3.48)。CYP1A1（I1e/Ile,Ile/Val,Val/Val)基因型在病例和对照中的分布存在差异（P＜0．05）。CYP1A1Val/Val基因型较具有CYP1A1 Ile/Ile的个体危险性增高（OR＝2.48,95%CI=1.12-5.54)。GSTM1缺失基因型在病例对照中分别为58．3％和43．6％，差异显著（OR＝1．81，95％CI＝1.03-3.18,P<0.05)。吸烟与CYP1A1 Val/Val基因型，吸烟与GSTM1缺失基因型之间存在相互作用。GSTM1基因缺失型的研究对象中，CYP1A1基因型在病例和对照中的分布差异显著（P＜0．05）。结论 CYP1A1 Val/Val基因型和GSTM1缺失基因型是西安地区食管癌的遗传易感性标志。吸烟与突变基因型有协同致癌作用；这种相互及其机理还有待于大样本、人群为基础的深入研究。

摘要：目的　探讨抗血管内皮生长因子 165 (VEGF165)核酶对人肺腺癌细胞生物学特性的影响。方法　设计合成针对VEGF1652 12位点的锤头状核酶 (vascularendothelialgrowthfactorribozyme ,VRz)及其突变体 (mutantVRz ,mVRz) ,体外检测核酶的剪切活性。采用亚克隆技术 ,构建腺病毒介导的抗VEGF165核酶真核表达载体pAdVRz ,用重组腺病毒感染人肺腺癌细胞A5 49,分别采用Northernblot印迹杂交、流式细胞仪、透射电镜和激光共聚焦等技术 ,观察感染前后A5 49细胞的生物学性状的改变。结果　成功地合成了具有明显剪切活性的抗VEGF165核酶VRz及其重组腺病毒表达载体rpAdVRz ,并在A5 49细胞中获得表达。重组腺病毒感染细胞的VEGF165表达减少了 87% ,而生物学性状不受外源基因表达的影响。结论　抗VEGF165核酶能够显著抑制人肺腺癌细胞内VEGF165的表达 ,为进一步进行肺癌的抗血管治疗提供了实验基础。

摘要：目的研究HCV全长(天然)核心蛋白(C蛋白)和成熟C蛋白在HepG2细胞内的亚细胞定位,为进一步研究C蛋白与宿主细胞蛋白因子相互作用提供实验依据。方法设计HCV全长和成熟核心基因引物,以pBRTM/HCV1-3011为真核表达载体为模版行PCR;将PCR扩增产物酶切纯化后定向插入pEGFP-C1的BeglⅡ和EcoRⅠ位点,得到能表达全长HCV核心蛋白(C191aa.)和成熟核心蛋白(C173aa.)的真核表达载体pEGFP-C1-C191、pEGFP-C1-C173;将扩增pEGFP-C1-C191、pEGFP-C1-C173质粒转染到HepG2细胞中,28h、5d在荧光显微镜下观察两种C蛋白的亚细胞定位。5d后再用免疫细胞化学法观察两种C蛋白在HepG2细胞中着色现象。结果HCV核心基因PCR产物和构建的pEGFP-C1-C191、pEGFP-C1-C173经扩增测序证实。pEGDP-C1-C191转染HepG2细胞28h后融合荧光全长C蛋白C191主要出现在核膜和胞质中,少部分出现在胞核及其膜中;而pEGDP-C1-C173转染HepG2细胞28h后主要定位在核中和核膜上。但pEGDP-C1-C191转染HepG2细胞5d后,其表达的融合荧光蛋白主要出现在核内和核膜上,少量在胞质中;而成熟C蛋白C173则仍然在胞核内及核膜上。pEGDP-C1-C转染HepG2细胞5d后进行免疫细胞化学显示,C191蛋白和C173蛋白主要在核中、核膜着色,胞质有少量着色。结论HCV全长C蛋白的亚细胞定位是一动态过程,先出现在胞质中和核膜上,最后定位在核中和核膜上;成熟C蛋白主要定位在核中和核膜上。这种现象为解释瞬时转染HCV不同长度C基因对p53/p21通路作用出现相反结果奠定基础。