摘要：参考 Gen Bank中番鸭呼肠孤病毒 (m uscovy duck reovirus,MDRV ) S1基因序列 ,用计算机设计并合成了 1对引物 HP11、HP12 ,以此引物用 RT- PCR对番鸭呼肠孤病毒 S1基因进行了特异性扩增。结果表明 :引物 HP11、HP12能从所有供试的 4株分离毒 MDRV- MW9710、MW980 6、MW980 9、MW9810扩增出 30 0 bp S1基因 c DNA片段 ,而不能从禽呼肠孤病毒 (ARV) S1133株和番鸭胚成纤维 (MDEF)细胞培养物中扩增出任何片段 ;该 RT- PCR的检测灵敏度为 1pg的病毒核酸 ,特异性强 ,重复性好 ,对含毒细胞培养液和尿囊液只需用氯仿进行简单处理 ,即能检测出 MDRV核酸。因此认为 ,该 RT-

摘要：参考GenBank番鸭呼肠孤病毒(muscovyduckreovirus,MDRV)S1基因序列设计合成一对引物,对番鸭呼肠孤病毒MW9710株S1基因进行RT＿PCR扩增,并对PCR产物进行了克隆和测序。结果显示扩增产物为300bp,与预期的目的片段大小一致,经PCR、酶切反应鉴定后克隆到pGEM＿Teasy载体中,核苷酸序列经BLAST软件分析表明:番鸭呼肠孤病毒MW9170株S1基因的目的片段与番鸭呼肠孤病毒法国89026株同源性为91 7%,与鸡关节炎病毒S2基因同源性为68 7%,结果提示番鸭呼肠孤病毒MW9710株与鸡关节炎病毒亲缘距离较远。

摘要：根据已发表的番鸭和鹅细小病毒基因组全序列 ,设计并合成了 1对通用引物 (PC1/PC2 )和 1对MPV特异引物 (PS1/PS2 )。以MPV_DNA、MPV尿囊液、MPV尿囊液和GPV尿囊液混合液、GPV_DNA、GPV尿囊液和GPV细胞培养物、DHV尿囊液和H2 O为模板在同一条件下分别以 2对引物进行扩增 ,PCR产物经 1 5 %琼脂糖凝胶电泳分析 ,结果显示 :在PC1/PC2系统中 ,除DHV尿囊液和H2 O外 ,所有样品均出现长约 4 80bp的特异核酸带 ,对MPV_DNA的敏感性为 0 2pg ,对GPV_DNA的敏感性为2pg ;对MPV尿囊液的敏感性为 10 0ELD50 / 2 μl;PS1/PS2系统中 ,只有MPV_DNA、MPV尿囊液及MPV尿囊液和GPV尿囊液混合液出现预期约 110 0bp特异扩增产物 ,对MPV_DNA的敏感性为 0 2ng ,对MPV尿囊液的敏感性为 10 0 0ELD50 / 2 μl,而GPV_DNA、GPV尿囊液、GPV细胞培养物、DHV尿囊液和和空白对照均未见到条带。分别以 1ngMPV_DNA、1ngGPV_DNA、MPV尿囊液、GPV尿囊液、DHV尿囊液和空白对照样品进行扩增 ,3次重复实验结果完全一致。表明该PCR检测技术可准确、快速鉴别番鸭和鹅细小病毒 ,为临床上准确。