摘要：为建立用于鹅星状病毒1(GAstV 1)和鹅星状病毒2(GAstV 2)感染快速检测的实时荧光定量RT-PCR方法,试验根据部分GAstV ORF2基因和部分3′非编码区序列设计合成特异性引物和探针,采用矩阵法获得引物和探针的最优浓度,在优化退火温度的基础上,分别建立扩增GAstV 1和GAstV 2的标准曲线,进一步验证该方法的特异性、敏感性和重复性,建立的方法用于临床样品的检测,并与文献报道的常规RT-PCR方法进行比较。结果显示:优化后的反应体系中最优上、下游引物浓度均为0.40(或0.50)μmol/L,探针浓度均为0.50μmol/L,扩增线性范围分别为3.26×10^(3)~3.26×10^(8)拷贝/μL和7.09×10^(3)~7.09×10^(8)拷贝/μL,相关系数均为0.998;该方法可特异性检出两种GAstV,但对新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、鸭坦布苏病毒、新型鸭呼肠孤病毒、鹅细小病毒和血清4型禽腺病毒6种鹅病相关病毒的核酸均无扩增信号;其检测限分别为3.26×10^(2)拷贝/μL和7.09×10^(1)拷贝/μL;组内变异系数和组间变异系数均低于3%。建立的实时荧光定量RT-PCR方法对临床样品的检测结果显示,GAstV阳性率为90.57%(96/106);而文献报道的常规RT-PCR方法对GAstV 1和GAstV 2的混合阳性率为62.26%。研究表明,建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法为同时检测GAstV 1和GAstV 2提供了快速、敏感、特异且能满足临床样本需求的检测方法。

摘要：工科毕业设计的传统指导模式在选题上存在命题的随意性较大、难易程度相差较大、选题的知识覆盖面不宽、研究内容单一的问题,在指导方式上不利于培养学生的合作精神与协调组织能力,不利于师资力量的培养和建设。为此,提出大项目小课题的毕业设计指导模式,即以教师科研项目为背景,将大项目分解成多个小课题,采用课题组团队指导、定期汇报的形式,实现教师与教师之间、学生与学生之间以及教师与学生之间相互交流、学习、督促的关系和作用。以"油罐区自动消防系统"为实例,说明了大项目小课题毕业设计指导模式的具体组织实施过程,实践证明该指导模式有利于培养学生学习、科研和团队合作能力等综合素质,能提高学生就业竞争力与适应能力,同时对师资力量的培养也有一定的促进作用。