摘要：马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是危害烟草的重要病害,种植抗病品种是经济有效的防治措施。分子标记辅助选择可提高抗病育种效率。来源于X-射线诱变的Virgin A Mutante(VAM)的隐性抗PVY基因位点(va)被广泛应用于烟草抗病育种。为了提高va位点的育种利用效率,根据烟草隐性抗PVY基因(感病基因)e IF4E-1基因序列,设计特异扩增的引物CF2GR11,开发e IF4E-1基因的分子标记,并检测了该标记与抗性的遗传距离和在常见烟草资源中的适用性。CF2GR11在云烟87、红花大金元和K326等感PVY品种可扩增出500 bp产物,在NC102、NC55和K326PVY等抗病品种无扩增条带。以抗、感PVY亲本构建的101个F2单株为定位群体,遗传连锁分析表明,CF2GR11标记与烟草PVY感病基因的遗传距离为0.99 c M。对46份PVY抗性明确的栽培烟草资源的检测表明,供试资源的标记检测结果与抗性的吻合度为100%,表明CF2GR11标记适用性高。该目的基因标记可用于抗PVY育种的辅助选择和抗PVY资源的鉴定。

摘要：针对烟草属特异性基因Ntsp151序列保守区设计环介导等温扩增(LAMP)引物,基于SYBR Green I荧光染料对烟草材料进行可视化LAMP检测,对检测过程中的DNA提取方法和反应条件进行优化,并对LAMP反应体系的特异性和灵敏度进行评价。结果表明:使用Chelex-100提取的DNA可以直接进行LAMP扩增反应,显色效果较好;LAMP最适反应条件为扩增温度63℃、反应时间60 min、Mg^(2+)浓度6 mmol/L;LAMP对17份非烟草材料和1份烟草材料基因组DNA的扩增显色结果与荧光值的检测结果一致,具有较好的特异性,其最低检测限为10^(2) copies/μL。基于烟草属特异性基因Ntsp151的LAMP检测结果可视化强,且灵敏度高、特异性强,适用于现场抽检。

摘要：为探究单核苷酸多态性(SNP)标记在复烤烟叶品种鉴别上的可行性,开发基于SNP标记的复烤烟叶高效鉴别技术,对4个主栽烟草品种云烟87、红花大金元、K326及NC102的复烤烟叶进行了全基因组测序,应用全基因组数据发掘SNP位点,依据SNP位点设计了PCR引物,并对不同烟草品种进行了基因分型和区分。结果显示,4个品种复烤烟叶全基因组测序共获得21.5 Gb数据,共检测出27137个SNP位点。挑选其中53个SNP位点设计不同错配类型等位基因引物570条,扩增结果均与预期一致。SNP位点35、45和51在品种间具有多态性,红花大金元在35、45、51位点基因型为T/T、C/C、T/T;K326为C/T、C/T、C/C;NC102为C/T、C/T、C/T;云烟87烟叶在35位点无扩增,在45、51位点的基因型为C/T、C/T。依据3个SNP位点的基因型构建不同品种的分子ID,可准确区分4个品种的复烤烟叶。

摘要：【背景和目的】RBRR1是通过远缘杂交与回交导入栽培烟草的一个单显性广谱型根黑腐病抗病位点,为了开发基于该位点的简单高效稳定且成本低的紧密连锁分子标记。【方法】在已有酶切扩增多态性序列(Cleaved amplified polymorphism sequences,CAPS)标记相关序列基础上,利用云晒1号基因组与抗、感根黑腐病材料重测序信息,基于其序列插入/缺失(Insertion/Deletion,InDel)多态性设计抗病相关分子标记,并开展遗传效应和遗传变异分析。【结果】筛选到4对具有良好多态性的引物,在目标单株的分子标记辅助选择中具备便捷、高效且呈共显性的特点。遗传效应分析表明,通过分子标记辅助选择导入RBRR1位点能够极显著提高栽培烟草根黑腐病抗性。遗传变异分析结果显示,在烟草核心种质资源中仅有白肋烟TN90和SoTa2携带有RBRR1抗病基因,并发现4对引物在普通烟草自然群体中呈现2种基因型。【结论】RBRR1抗病位点在我国尚未进行广泛利用,具有较高的利用价值;而开发的4个InDel标记可用于该抗性位点的分子标记辅助选择育种和后续抗病基因的精细定位与克隆。

摘要：餐饮业在我国第三产业中占有较高的比例,餐饮管理的信息化是未来的发展趋势。作为餐饮管理信息系统的一个子系统,电子点餐系统得到了较好的发展。然而市场上的电子点餐系统都是基于PDA技术或者POS点餐机技术,存在通用性较差、附加功能少、系统升级比较难、成本高等缺点。基于Android平板电脑的点餐系统具有硬件供应商多、价格便宜、软件通用等优点,将成为点餐系统未来的发展趋势。本文首先介绍了点餐系统的功能要求,然后探讨了基于Android平台点餐系统的硬件架构,最后对基于C/S结构的软件设计进行了研究。

摘要：本文重点描述了开源嵌入式数据库SQLite对数据的组织方法和其中B树页的结构,并对利用SQLite建立的数据库文件进行了的设计。在此基础之上,进一步对SQLite中实现此部分的程序代码进行了更深入的分析。最后利用SQLite中提供的接口函数完成了对红-黑树的操作程序,实现了在数据库中对B树的应用,完成了对该数据库的优化。

摘要：为创制双抗黑胫病(0号生理小种)和普通花叶病(TMV)的烟草种质,采用母本来源单倍体技术将Coker371和Coker176杂交后代F_1与烟属野生种非洲烟草(N. africana)杂交,经形态观察,结合流式细胞仪倍性鉴别,获得了母本来源的单倍体苗,并对分子标记辅助选择获得的目标单倍体进行叶脉培养加倍,创制了双抗黑胫病及TMV烤烟新种质RBST(Resistant to black shank and TMV)。苗期人工接种抗病鉴定、分子标记辅助检测和田间农艺性状鉴定表明,RBST的抗病性和农艺性状稳定,可用作烟草品种抗性定向改良的抗源材料。

摘要：烟草普通花叶病(TMV)是烟区的主要病害之一,生产上所用抗源都来自烟属的心叶烟(Nicotiana glutinosa),其携带N基因对TMV免疫,但因连锁累赘导致烟叶品质差,难以在生产上大面积使用。因此,从烟属植物中挖掘新的TMV抗源尤为必要。本研究以烤烟品种红花大金元与野生种圆锥烟草(***,PI 555550)为亲本,开展远缘杂交,获得了种间杂种。杂交种SSR、GISH及抗病性鉴定结果表明,杂交种含双亲特征条带,接种TMV后,叶片有枯斑反应。N基因特异引物在圆锥烟草及杂交种中未能扩增,而根据N基因同源基因Np片段设计的特异引物扩增到500 bp的片段,携带N基因的RBST及心叶烟草(*** PI 555507)中未扩增到此特异片段,在杂交种扩增到此特异片段。该研究为获得新的TMV抗源奠定了材料基础。

摘要：[目的]探索高效、准确地鉴别类烟产品的抽样方案和检验方法,对保障真品卷烟的合理流通、市场监管和烟草专卖具有重要意义。[方法]以400支类烟产品(茶烟)为材料,按统计抽样检验原理,研究设计适合类烟产品最小抽样量和最大抽样量的序贯抽样检验方案,以卷烟标准样品为参比,利用已开发的DNA标记对抽取的类烟产品准确性、可靠性进行鉴定验证。[结果]该研究建立的序贯抽样检验方案保证了目前行业标准检验方法的可靠性和精确度,使用该方案,确定了抽样理论最小样本数52个,最大抽样量363个,最多进行11次检验即可得出鉴别结论,且抽样特性曲线具有相对较高的稳定性和灵敏度。DNA标记检验表明,卷烟标准样品在250 bp分子量处扩增出了特异性条带,而初次抽样的52个类烟产品均未在250 bp分子量处扩增出特异性条带。[结论]按该研究设计的序贯抽样检验方法,只需检验很小的样本(52个),经DNA标记验证,其抽样确定的类烟产品真伪准确、客观。