摘要：设计并制作1台用于大鼠的循环式吸入麻醉装置,并对大鼠的麻醉效果进行手术验证。利用CDR绘图软件设计麻醉装置样图,然后收集所需材料根据设计样图组装吸入麻醉装置。随机选取10只SD大鼠,使用本装置将其麻醉进行常规手术(开腹探查和胃切开术),术中记录麻醉各个阶段的时间,并用生理监测仪连续动态监测大鼠呼吸(RR)、心率(HR)、血氧(SpO2)、收缩压(SBP)、平均动脉压(MAP)和体温(t),同时观察大鼠镇静、镇痛和肌松效果,以评价麻醉装置的安全性和可用性。根据设计样图完成了吸入麻醉装置的连接和组装。用该装置对大鼠麻醉诱导的时间为(2.20±0.45) min,达到外科麻醉所需时间为(2.12±0.36) min,麻醉维持和苏醒时间分别为(45.18±0.12),(2.40±0.55) min,麻醉总时间为(51.40±0.24) min。术中大鼠镇静、镇痛、肌松弛效果良好,在手术后10,20,30,45 min时HR、SpO2、RR、T、SBP、MAP均保持平稳,各项生理指标在每个时间点都无显著性差异(P>0.05)。该吸入麻醉装置对大鼠麻醉效果确实、安全可控,麻醉诱导和苏醒时间较快,可完全满足手术对麻醉的要求。

摘要：本试验采用体外法研究壳聚糖(CTS)对无乳链球菌(***)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)炎性损伤的保护作用。首先,采用不同浓度(0、15.625、31.25、62.5、125、250、500和1000 mg/mL)的CTS处理BMECs 12和24 h后,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测BMECs活性,根据BMECs活性筛选出CTS的适宜作用时间(24 h)和作用浓度(31.25、125和250 mg/mL),用于后续试验。然后,采用双因素试验设计,以不进行CTS处理和***诱导的BMECs作为对照组,以***诱导6 h的BMECs作为***组,以不同浓度(31.25、125和250 mg/mL)CTS处理24 h的BMECs作为CTS组,以不同浓度(31.25、125和250 mg/mL)CTS处理24 h后再经***诱导6 h的BMECs作为CTS(-)+sgc组,每组4个重复。使用荧光定量PCR的方法检测各组BMECs的白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-8、Toll样受体2(TLR2)、髓样分化因子88(MyD88)、白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK 4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和转化生长因子β活化激酶1(TAK1)的mRNA表达量,使用Western blot的方法检测各组BMECs的核因子-κB(NF-κB)抑制蛋白-α(IκB-α)、磷酸化NF-κB-p65(p-NF-κB-p65)、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的蛋白表达量。结果显示:1)31.25和125 mg/mL的CTS显著或极显著降低了BMECs的IL-6、IL-8、TLR2、MyD88、IRAK4和TRAF6 mRNA表达量(P<0.05或P<0.01);31.25、125和250 mg/mL的CTS极显著降低了***诱导的BMECs的IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-8、TLR2、MyD88、IRAK4、TRAF6和TAK1 mRNA表达量(P<0.01)。2)31.25、125和250 mg/mL的CTS显著或极显著降低了BMECs和***诱导的BMECs的p-NF-κB-p65、p-p38、p-ERK1/2和p-JNK蛋白表达量(P<0.05或P<0.01)。由上述结果可知,CTS可以通过抑制NF-κB和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路转导来降低***诱导BMECs产生炎症反应,从而有效保护细胞,降低炎性损伤作用。

摘要：本试验旨在通过响应面法优化超声波辅助提取公英散工艺参数,并对公英散水提物的体外抗氧化和抑菌活性进行测定。通过单因素试验确定各因素的取值范围,用Plackett-Burman设计并筛选出超声温度、超声时间、液料比3个显著影响公英散提取效率的因素,然后采用Box-Behnken响应面分析法得出最佳提取条件。通过微量肉汤稀释法和Kirby-Bauer纸片扩散法评价公英散水提物体外抑菌活性,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法和羟自由基清除法研究公英散水提物体外抗氧化活性。结果表明:在超声波功率420 W、超声温度80℃、超声时间65 min、液料比37∶1时,公英散的提取效率最高。公英散水提物对3种奶牛乳房炎临床致病菌都有不同程度的体外抑制作用,对大肠杆菌(***)的最低抑菌浓度(MIC)为9.00 mg/mL,最低杀菌浓度(MBC)为18.00 mg/mL;对无乳链球菌(***)的MIC为4.50 mg/mL,MBC为9.00 mg/mL;对金黄色葡萄球菌(***)的MIC为2.25 mg/mL,MBC为4.50 mg/mL。此外,当公英散水提物浓度达到1.00 mg/mL时,对羟自由基(78.70%)和DPPH自由基体外清除率(75.63%)良好。综上所述,本试验成功筛选出了公英散的最佳提取工艺条件,且所得公英散水提物有良好的体外抗氧化活性,并对3种奶牛乳房炎临床致病菌均有不同程度的体外抑菌活性。

摘要：本试验旨在研究青蒿素对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)乳脂合成相关基因表达的影响。采用单因素完全随机试验设计,添加青蒿素浓度分别为0(对照)、10、20、40、60、80、100μmol/L的培养基与BMECs共培养1、3、6、9、12和24 h,每组6个重复。结果表明:与对照组相比,作用12 h后,青蒿素浓度为20、40、60μmol/L极显著提高了BMECs的相对活性(P<0.01),显著提高了脂质的聚集和细胞内甘油三酯(TG)的含量(P<0.05);实时荧光定量PCR结果表明,青蒿素能显著提高乳脂合成相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、胆固醇调节元件结合蛋白1-c(SREBP1-c)、脂肪酸合成酶(FASN)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)基因相对表达量(P<0.05);青蒿素也可极显著提高丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)基因相对表达量(P<0.01);Western-blot结果表明,40μmol/L的青蒿素显著上调了腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、mTOR、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、PPARγ、SREBP1-c蛋白的表达(P<0.05)。综上所述,40μmol/L的青蒿素提高BMECs乳脂合成的效果较好,青蒿素通过调控AMPK-mTOR信号通路中关键基因的转录从而促进BMECs中乳脂肪的合成。

摘要：本试验旨在通过体外法研究竹叶黄酮(BLF)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)抗氧化及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路中关键基因表达的影响。采用单因素试验设计,对照组不添加BLF,试验组分别添加不同浓度(0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、60.0、100.0μg/mL)BLF,处理BMECs 3、6、12、24和48 h后,应用细胞增殖试剂盒(CCK-8)法检测BMECs的活性,应用乳酸脱氢酶(LDH)法检测BLF对BMECs的毒性,每次试验平行复孔6个,重复试验3次。分别应用流式细胞仪和试剂盒法检测BLF对BMECs抗氧化指标的影响,并应用实时荧光定量PCR法检测凋亡相关基因以及mTOR信号通路中相关基因表达量的变化。结果表明:1)BLF对BMECs活性适宜作用浓度为1.0、5.0、10.0μg/mL,最佳作用时间为12 h,且此浓度的BLF对BMECs无毒性作用。2)流式细胞仪检测结果表明,与对照组相比,5.0、10.0μg/mL的BLF极显著降低了BMECs的早期凋亡率和晩期凋亡/坏死率(P<0.01),BLF极显著降低了BMECs的总凋亡率(P<0.01)。3)与对照组相比,5.0μg/mL的BLF极显著降低了细胞内活性氧(ROS)的生成和线粒体膜电位(MMP)水平(P<0.01)。4)与对照组相比,添加BLF可极显著升高BMECs的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)(P<0.01)活性极显著降低丙二醛(MDA)的含量(P<0.01)。5)实时荧光定量PCR的结果表明,与对照组相比,添加5.0μg/mL的BLF显著降低B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)的基因相对表达量(P<0.05);BLF可极显著提高B淋巴细胞瘤/白血病-2(Bcl-2)的基因相对表达量(P<0.01),极显著降低Bax/Bcl-2的比值(P<0.01);添加5.0和10.0μg/mL的BLF显著降低环氧合酶-2(COX-2)基因相对表达量(P<0.05),极显著降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)基因相对表达量(P<0.01),极显著提高真核翻译起始因子4E结合蛋白1(EIF-4EBP1)基因相对表达量(P<0.01);此外,与对照组相比,BLF可极显著提高BMECs中mTOR信号通路关键调控基因mTOR、核糖体p70s6(S6K1)和细胞周期素D1(Cyclin D 1)基因相对表达量(P<0.01),极显著提高β-酪蛋白(β-casein)基因相对表达量(P<0.01)。综上所述,BLF可促进BMECs的活性,减少ROS的积累和MMP水平;BLF可显著提高BMECs的抗氧化能力,降低凋亡相关基因的表达,通过mTOR信号通路转导,从而影响乳蛋白的合成。

摘要：本试验通过研究不同泌乳水平奶牛在瘤胃发酵和血清代谢上的差异,从消化和代谢的角度解释不同泌乳水平奶牛的泌乳合成机制差异,为提高奶牛的生产性能提供理论依据。试验采用随机区组设计,选择24头体况良好、体重[(648.50±68.65)kg]、胎次[(2.64±0.70)胎]相近的泌乳中期[(182.0±31.5)d]荷斯坦奶牛,按产奶量分为高产组[(41.7±4.8)kg/d]和低产组[(24.1±3.9)kg/d],各12头,在相同的饲养管理条件下饲喂相同的全混合日粮。分别用乳成分分析仪、酶免法、比色法和气相色谱法对乳成分、血清代谢指标及瘤胃发酵参数进行测定。结果表明:1)高产组奶牛乳成分中乳蛋白、乳脂和乳糖含量极显著高于低产组(P<0.01),乳总固形物含量显著高于低产组(P<0.05),而乳蛋白率极显著低于低产组(P<0.01);2)高产组奶牛瘤胃中总挥发性脂肪酸、丙酸及丁酸含量极显著高于低产组(P<0.01),乙酸含量显著高于低产组(P<0.05);3)高产组奶牛血清能量代谢指标葡萄糖(GLU)和甘油三酯(TG)含量极显著低于低产组(P<0.01),非酯化脂肪酸(NEFA)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著低于低产组(P<0.05),β-羟丁酸(BHBA)含量极显著高于低产组(P<0.01);抗氧化指标血清丙二醛(MDA)含量显著高于低产组(P<0.05),总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性显著低于低产组(P<0.05);免疫指标血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量极显著低于低产组(P<0.01),免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-6(IL-6)含量显著低于低产组(P<0.05),而免疫球蛋白M(IgM)含量显著高于低产组(P<0.05)。综上所述,高、低产奶牛在瘤胃发酵及血清代谢指标方面存在显著性差异。

摘要：【目的】制作了一款适用于小型动物的异氟烷吸入麻醉装置,用于麻醉豚鼠。【方法】基于现代动物麻醉学理论,先用制图软件设计麻醉装置样图,收集材料组装完成吸入麻醉装置;选取豚鼠40只,随机分为5个异氟烷浓度组(2%、2.5%、3%、3.5%、4%),使用本装置对其进行全身麻醉,记录麻醉各阶段所用时间,并通过监测麻醉过程中豚鼠的呼吸(RR)、心率(HR)、血氧(SpO 2)和体温(T)等生理指标的变化以及镇静、镇痛和肌松效果,评价该麻醉装置的安全性和实用性。【结果】采用本麻醉装置在异氟烷(2.5%、3%、3.5%)下对豚鼠进行全身麻醉,豚鼠达到外科麻醉深度的时间为(2.00±0.71)min,麻醉过程中豚鼠心率和呼吸次数稳定,体温下降不明显,部分生理反射迟钝或消失,苏醒时间约为(2.20±0.45)min。【结论】本设计装置能够用于豚鼠进行全身麻醉,效果确实、安全性好;异氟烷浓度为2.5%~3.5%时麻醉效果最佳,可广泛用于豚鼠等小型动物的试验操作。