摘要：以灵芝栽培0（对照）、1、2、3a的土壤为研究对象，采用选择性培养基分离计数三大主要微生物类群（细菌、放线菌和真菌）以及与灵芝生长繁殖密切相关的两大生理微生物类群（好气性纤维素分解菌、好气性自生固氮菌）。结果表明，随着栽培年限的增加，土壤中的微生物总数和细菌数量呈下降趋势，放线菌数量波动较大，先增加后减少；细菌、放线菌数量占微生物总数比例逐渐降低，真菌数量比例逐渐增加，其中细菌占绝对优势（83．36％～94．21％），放线菌次之（5．44％～15．04％），真菌最少（0．35％～1．60％）；好气性纤维素分解菌和好气性自生固氮菌数量均逐渐减少，尤其是栽培2a后各类微生物的数量与对照的差异均达到极显著水平。由此可知，连作使灵芝土壤微生物区系的结构和数量发生了改变。连作土壤中分离鉴定出6个菌属的优势细菌，分别为芽孢杆菌属（Bacillus）、假单胞菌属（Pseudomonas）、分枝杆菌属（Mycobacterium）、产碱杆菌属（Alcaligenes）、黄杆菌属（Flavobacterium）、短杆菌属（Brevibateriurn）；2个菌属的优势放线菌，分别为链霉菌属（Streptomyces）、小单孢菌属（Micromonospora），其中Streptomyces种类较多，有灰色类群、黄色类群、蓝色类群、白色类群、淡紫灰类群；6个菌属的优势真菌，分别为：木霉属（Trichoderma）、青霉属（PeniciUium）、曲霉属（Aspergillus）、毛霉（Mucous）、链孢霉属（Neurospora）、根霉（Rhizopus）。将分离的菌种制成发酵素，分别加入到按正交试验设计进行组合的发酵原料中，当覆土层中发酵原料紫檀木屑、枫树木屑、椰糠椰壳、玉米秸秆与连作2a的土壤按1：2：2：2：2的比例加入时，灵芝增产率最高。