摘要：为获得耐碱性β-葡萄糖苷酶,进一步研究碱性β-葡萄糖苷酶的酶学性质。从实验室已有蜂蜜中筛选出一株耐碱性的高地芽孢杆菌Bacillus altitudinis SYBC hb4,根据Bacillus altitudinis SYBC hb4中β-葡萄糖苷酶(bglA)基因序列设计一对引物,通过PCR扩增技术,获得β-葡萄糖苷酶基因(bglA),将扩增后的bglA与质粒pColdII构建重组表达载体pColdII-bglA,并转化至大肠杆菌*** BL21(DE3)中表达。重组表达的β-葡萄糖苷酶酶活可达12.40 U/mL;该重组β-葡萄糖苷酶最适反应温度为60℃;最适反应pH值为pH 8.0;5 mmol/L的Mg^(2+)可使酶活提高50%左右。本实验所获得的碱性β-葡萄糖苷酶比已报道的重组酶在碱性条件下稳定性更好。

摘要：研究了高山被孢霉液态发酵产花生四烯酸过程中主要底物和培养条件对花生四烯酸产量的影响。采用单因素和正交试验设计优化了碳源、氮源、无机盐的种类及浓度,找出了最佳的培养温度和变温策略。试验结果显示最佳碳源和氮源及浓度是:玉米粉66 g/L,豆粕粉54 g/L;最佳无机盐配方是:KH_2PO_43 g/L,MgSO_41 g/L,Na_2SO_42 g/L。采取逐级变温培养:30℃(3 d),25℃(4 d),20℃(4 d)。优化后生物量和花生四烯酸产量分别达到52.3和13.6 g/L。

摘要：人增殖诱导配体在促肿瘤细胞增殖以及自身免疫性疾病中具有重要的作用.从GenBank中查出人APRIL的序列号(AF046888),根据其胞外可溶部分序列设计引物,采用RT-PCR技术从健康人新鲜血液单核细胞(PBMCs)总RNA中克隆出人sAPRILcDNA,将该cDNA克隆入原核表达载体pET30a,经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,经SDS-PAGE后在17000左右有一明显的表达条带,该蛋白主要以包涵体形式存在,表达量达45%左右,将包涵体蛋白变复性后进行细胞生物活性实验,为进一步研究其临床应用奠定了基础.

摘要：BAFF和APRIL是新近发现的TNF配体超家族2个关系密切的成员。虽然它们共用2个受体BCMA和TACI,但转基因和基因敲除小鼠模型揭示它们各自功能并不冗余。BAFF是外周血B细胞一个关键的存活与成熟因子,它的活性通过其特异性受体BAFF-R调节,其过表达与自身免疫性疾病发生和B细胞肿瘤形成有关。APRIL在不依赖T细胞的Ⅱ型抗原反应和T细胞存活过程中扮演重要角色,同时它也能诱导一些非淋巴细胞的增殖和存活,在许多肿瘤细胞株和肿瘤组织文库中发现有高表达的APRIL。针对BAFF/APRIL系统设计出治疗相关疾病的生物制剂有着非常令人乐观的应用前景。

摘要：[目的]确定提取芭蕉芋叶绿素的最佳溶剂,准确鉴定芭蕉芋中的叶绿素,优化叶绿素提取工艺。[方法]对比氯仿、甲醇、90%乙醇、95%乙醇、100%乙醇、90%丙酮、95%丙酮、100%丙酮的提取效果,确定最佳提取剂;通过高效液相色谱与质谱联用手段,准确鉴定叶绿素a和b;在研究单因素提取温度、提取时间、固液比对叶绿素提取率影响的基础上以芭蕉芋叶为材料,95%乙醇为提取剂,采用正交实验设计研究各因素的显著性及叶绿素提取最佳工艺。[结果]确定了95%乙醇为最佳提取剂;准确鉴定了提取液中的叶绿素a和b;优化最佳提取条件为提取温度60℃,提取时间4 h,固液比1∶20。[结论]采用95%乙醇作为提取剂,在优化后条件下得到叶绿素提取率为75. 71%。