摘要：目的构建1个含有luxS基因上、下游片段、抗卡那霉素基因的重组克隆质粒,用以敲除表皮葡萄球菌luxS基因。方法检索GenBank获得luxS基因序列以设计引物,以生物膜阳性表皮葡萄球菌基因组DNA为模板,采用高保真PCR扩增得到包含luxS基因上游片段、完整的luxS基因和luxS基因下游片段的长片段DNA;以pEASY-T4质粒为模板扩增得到抗卡那霉素基因,再用内侧引物分别扩增luxS基因上、下游序列,按luxS基因上游片段+抗卡那霉素基因+luxS基因下游片段的顺序重组连接,转化JM109感受态细胞,通过卡那霉素筛选、酶切分析和PCR-测序验证luxS基因敲除的重组克隆载体。结果经酶切后电泳验证重组质粒中各目的片段插入无误,PCR检测结果证明重组质粒luxS基因缺失,测序结果显示碱基无错配,含目的基因的重组质粒菌株在含卡那霉素培养平板内正常生长,证明插入的抗卡那霉素基因表达良好。结论表皮葡萄球菌luxS基因敲除重组质粒构建成功,为后续luxS基因缺陷株的构建奠定了基础。

摘要：植物遗传资源对于人类的生存和发展具有重要意义,植物遗传资源的保护与利用关乎实现可持续发展的目标。因此,植物遗传资源的教学必须与思政教育相结合,旨在培养学生的思政意识和社会责任感。植物遗传资源课程思政教育能够引导学生关注环境问题,理解生物多样性的重要性,激发学生积极参与植物遗传资源保护和可持续利用的热情,具有重要意义。

摘要：航空整体加强框铣削加工过程中,工艺孔布局设计的合理性对其弹性变形的影响非常显著。针对航空整体加强框孔数与孔位设计依靠经验法和试错法的现状,提出一种面向加工的孔布局优化设计方法。首先,基于孔在制造中承担工艺功能的不同,将其分为主定位孔与辅定位孔两类;接着,初始化主定位孔布局,利用有限元法仿真铣削加工过程,以最大铣削变形量最小为目标,确定该主定位孔布局对应的辅定位孔布局;然后,以铣削变形平均值最小为目标,结合萤火虫算法与加权法实现最优主定位孔布局的搜索;最后,以某航空典型整体加强框为例,验证了该方法的可行性和有效性。

摘要：当前，高校的英语教学模式正在不断改变。传统的任务型教学转变为现在的合作教学，是教学领域的一个重大突破。近年来，尤其在英语写作课程中，合作教学扮演着至关重要的角色。本文结合社会建构主义和认知的结构主义两个理论，设计有关合作型教学下英语写作的调查问卷。根据得到的数据进而分析合作教学写作在常熟理工学院的运用情况和效果。最后得出结论：合作教学可以提高写作效率，促进学生思维的活跃性，同时能激发写作兴趣和团队精神。

摘要：一年之计在于春,春天总是给人带来美好的憧憬。在孩子们的眼中,春天的景色无疑是最美的--柳树发芽,花朵绽放,树木蓬勃生长,就连小燕子也出来凑热闹了!在这美好的春天,孩子们积极地参与艺术活动,体验创作的乐趣,感知大自然的魅力,用一幅幅作品表达他们对春天的热爱、向往和期待!

摘要：为了满足少儿机器人编程产品的发展需求,文章提出了采用micro:bit开发板作为控制中心,以动漫形象作为可编程机器人的造型。从目标人群分析、功能设计分析、造型分析三个方面确定该机器人的设计思路,从功能设计和造型设计两方面开展可编程机器人的设计实践活动。希望对可编程机器人设计提供新的设计方向。

摘要：目的应用软件和在线网络分析EgG1Y162的氨基酸序列,了解其理化性质及二、三级结构特点;预测该抗原的T、B细胞表位,筛选优势表位并将其与热休克蛋白HSP70进行联合重组表达,验证该新型多表位疫苗刺激机体产生的免疫反应。方法通过NCBI检索获取EgG1Y162和HSP70的氨基酸序列,利用Protparam、NetPhos、TMHMM-2.0等在线程序分析EgG1Y162蛋白的分子质量、等电点、氨基酸组成、跨膜结构域、磷酸化位点,预测其二、三级结构及T、B细胞表位。结合预测结果优化确定最终的表位信息,将优化的优势表位信息与HSP70分子对接,构建重组HSP70-EgG1Y162,通过酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测对比分析HSP70蛋白、EgG1Y162和HSP70-EgG1Y162诱导产生的免疫反应强度。结果预测EgG1Y162蛋白由120 aa组成,HSP70由762 aa组成。在线分析EgG1Y162蛋白的二级结构中α-螺旋约占22.50%,延长链约占28.33%,β-转角约占6.67%,无规则卷曲约占42.50%。筛选EgG1Y162抗原的优势T、B细胞表位,然后以HSP70蛋白为载体与EgG1Y162抗原T-B细胞联合表位及连接蛋白Linker-GGGS构建HSP70-EgG1Y162多表位疫苗,免疫小鼠后取脾细胞进行ELISPOT检测,反应斑点的灰度值较对照组显著增高,即HSP70-EgG1Y162具有免疫原性。结论生物信息学方法分析预测细粒棘球绦虫EgG1Y162蛋白含有丰富的T、B细胞表位,筛选的优势表位与热休克蛋白HSP70融合后能够增强该新型包虫多表位抗原的免疫原性,ELISPOT证实以HSP70蛋白和EgG1Y162构建的HSP70-EgG1Y162多表位疫苗免疫原性增强,该设计方法有望成为设计优势疫苗的一种新方法,为包虫病的预防提供新思路。