摘要：外泌体是直径在30~100nm的胞外囊泡,通过细胞被释放到细胞外液中[1]。它们存在于生物体液中,诸如血液和脑脊液。外泌体携带有DNA、RNA、蛋白质和脂质等。由于外泌体的微泡结构为其内在的小分子提供了一个安全稳定的环境,同时这些信号小分子利用循环系统在胞间信号交换发挥重要作用,这让外泌体表现出一个成熟、稳定的信号传输系统[2]。研究发现,外泌体中的mRNA和microRNA(miRNA)可从一个细胞转移到另一个细胞中,并在新的细胞中发挥功能[3]。因此,外泌体是理想的细胞间信息传递媒介[4]。外泌体通过如下3种方式进行细胞间信息传递:膜融合后内容物释放、膜表面信号分子以及信号分子胞外释放。细胞可通过分泌外泌体对各种刺激作出应答,在肿瘤组织中,肿瘤局部缺氧可以促进乳腺癌细胞释放更多的外泌体进入肿瘤微环境。

摘要：目的:研究下调着丝粒蛋白W(centromere protein W,CENP-W)的表达水平对人脑胶质瘤U87细胞的影响。方法:采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制人脑胶质瘤U87细胞CENP-W的表达,采用RT-qPCR和Western blot法评价siRNA的干扰效果,采用MTT法、BrdU实验和平板集落形成实验测定细胞的增殖,Transwell小室检测细胞侵袭力的变化,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的改变。结果:MTT实验、平板集落形成实验和BrdU实验显示转染siRNA的实验组U87细胞的增殖能力、集落形成能力较空白对照组及阴性对照组明显降低;Transwell实验和划痕实验显示实验组细胞的迁移、侵袭能力较空白对照组及阴性对照组明显减弱;流式细胞术分析表明实验组细胞的细胞周期被阻滞在G_0/G_1期;实验组细胞凋亡比例较对照组增多(P<0.05)。结论:下调CENP-W的表达可抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进细胞的凋亡,提示CENP-W有望成为人脑胶质瘤基因治疗的候选靶点。

摘要：目的探讨外泌体对人神经母细胞瘤细胞株（SH—SY5Y）缺氧再灌注损伤的影响。方法构建人脐静脉血管内皮细胞（mJVEC）缺氧再灌注损伤（HUVECI／R1模型．从中提取外泌体并予以鉴定。构建***5Y细胞缺氧再灌注损伤（***5YI／R）模型并分为2组．其中外泌体组于再灌注同时予以外泌体刺激，对照组于再灌注同时予以无外泌体血清培养基培养。采用CCK8法检测2组细胞培养24h、48h、72h时细胞活力，采用Hochest33258染色检测细胞凋亡情况，采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况及细胞周期，采用划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测细胞迁移能力和侵袭能力，采用***、Westernblotting检测细胞中Caspase-3、Bax、Bcl-2mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较，外泌体组细胞培养48h、72h时细胞活力明显提高（48h：0．70±0．05vs0．94±0．08；72h：0．83±0．05vs1．02±0．06），G0／G1期细胞比例明显降低（71．26％±5．24％vs566．87％±4．23％）．S期细胞比例明显增高（14．39％±4．11％vs20．54％±3．46％），相对划痕损伤面积明显减少（0．61±0．07vs50．52±0．10），穿膜细胞数量明显增多（44．00±6．56vs70．67±6．11），细胞中Bax、Caspase-3mRNA表达水平明显降低、Bcl-2mRNA表达水平明显增高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论HUVECI／R模型来源外泌体可在SH-SY5Y细胞缺氧再灌注损伤后发挥神经保护作用。