摘要：目的:基于PsbA-trnH片段,利用测序技术寻找野生和栽培地黄此区域序列差异位点,为地黄野生和栽培种的分子鉴定提供依据。方法:提取地黄叶片的DNA,以PsbA-trnH序列通用引物进行PCR扩增,扩增产物经纯化后测序,利用MEGA 7.0软件比对寻找差异位点,基于差异位点设计特异性引物,采用两步法进行PCR扩增,优化反应体系并对此方法进行耐受性和适用性考察。结果:建立了野生和栽培地黄的位点特异性PCR鉴别方法:引物的序列为ZP1-F:TTT AGT ATT TAA TAT TTG AT,ZP1-R:CAA ATT CGA CTT TTT GCT GA;反应体系:2×Taq Plus Master Mix 12.5μL,上下游引物各1μL(10μmol/L),DNA模板1μL,ddH2O 9.5μL;扩增程序:95℃1 min;95℃10 s,39℃30 s,30×;72℃15 s。栽培地黄均能在100~200 bp之间扩增出2条条带,野生地黄无条带,方法的适用性和普适性良好。结论:本次实验所建立的特异性PCR鉴别方法可作为野生种和栽培种地黄鉴定准确而有效的分子方法。

摘要：目的:建立一种客观、准确、有效的平贝母位点特异性PCR鉴别方法。方法:收集平贝母及其他贝母材料,提取样品总基因组DNA,分析比对平贝母及其他贝母ITS片段,根据差异位点设计平贝母特异性引物,采用两步法进行PCR扩增,优化反应体系并对该方法进行耐受性和适用性考察。结果:建立了平贝母的位点特异性PCR鉴别方法:引物的序列为PB-Y1F:CGGGCGGACAATTTACTT,PB-Y1R:AGATAGAGAGCGGGCGTC;反应体系:2×Taq Plus Master Mix 12.5μL,上下游引物各1μL(10μmol),DNA模板1μL,ddH_(2)O 9.5μL;扩增程序:95℃1 min;95℃10 s,57℃25 s,30个循环;72℃15 s。平贝母均能扩增出约186 bp片段,其他贝母及阴性对照无条带,方法的适用性良好。结论:该实验设计的平贝母特异性引物专属性强,所建立的特异性PCR方法可以用于平贝母药材的准确鉴别。

摘要：药用植物栽培学是中药资源与开发专业的专业核心课程。文章探讨了在疫情常态下药用植物栽培学课程思政的意义和建设思路,从教学大纲、教学设计和教学评价等方面进行了课程思政教学改革的探索和实践,对推进中药资源与开发专业学生的思政教育具有重要的实践意义。