摘要：为研究水提法提取莲花蜂花粉多糖的条件,在单因素试验的基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,选取料液比、浸提时间和浸提温度三因素三水平进行响应面分析,建立多糖提取率的二次回归方程,得到提取工艺的优化组合条件。结果表明:料液比、浸提时间和浸提温度对莲花蜂花粉多糖提取率都有显著影响,当提取工艺条件为料液比1:9.4(g/mL)、浸提时间2.4h、浸提温度81.6℃、浸提2次时,莲花蜂花粉多糖提取率预测值为1.2201%、验证值为1.2317%。

摘要：拟设计在体内低毒、靶向肿瘤细胞的抗癌多肽(记:GPG),克服在抗癌治疗中使用化学类药物存在的缺点,探讨用荧光光谱评价靶向肽对肿瘤肿块包覆状况的方法;进行仅用一组基于双报告基团的小鼠模型(用EGFP转染的鼠肝肿瘤细胞H22,记:H22-EGFP与荧光染料Cy7标记的GPG,记:Cy7-GPG,作报告基团),就能完成抗癌肽体内主要性能监测的研究。用H22-EGFP构建小鼠移植瘤模型,尾静脉注射Cy7-GPG后,用成像仪(Ex=750 nm)观察到肿瘤的荧光光子数不断增大,从第4 h的(3.90±0.260)×10^6 photons·(s·cm^2)^-1(单位下同)升至第24 h的(1.28±0.330)×10^8,橙色荧光全部聚集到肿瘤上,而对照组中Cy7的荧光没有聚集在肿瘤上,且肿瘤上光子数也无明显变化;此时,用成像仪在实验组同一只鼠上,分别用750和488 nm激发波长录得包覆状物和实际肿瘤肿块的图片,表明它们的大小和形状一致;以上两项测定后,再每2 d一次往上述实验组鼠体内注射GPG,在成像仪上(Ex=488 nm)监测到它们的肿瘤变小,荧光光子数逐渐降低,从第2 d的(4.15±0.291)×10^6降至第56 d的(4.75±0.283)×10^4,空白对照组正相反。GPG与化学药物环磷酰胺抗癌活性相当,但后者对小鼠毒副作用严重;最后,往上述GPG药效实验组鼠体内注射Cy7-GPG, 48 h后处死小鼠,取出内脏器官及肿瘤肿块,在成像仪上(Ex=750 nm)录得它们的荧光光子数。实验表明GPG靶向性强、对肿瘤肿块包覆程度高、药效强,对其他主要脏器无毒副作用。本文构建的基于双报告基团荧光成像模型,可监测靶标被包覆状况,克服了传统只能对靶向肽靶向功能进行评价的弊端,增进对药物作用机理的认识;本文仅消耗一组实验鼠模型,节约实验成本、简捷地监测了靶向肽主要性能,表明GPG在体内性能较好,具有应用价值。

摘要：为研究莲花蜂花粉的最佳酶解破壁条件,通过单因素试验确定纤维素酶-果胶酶-木聚糖酶-木瓜蛋白酶4种酶制剂的比例,在酶解破壁条件的单因素试验基础上,采用二次回归正交旋转组合设计试验方法对酶解条件进行优化,建立酶解pH值、复合酶加入量、酶解温度、料水比与破壁率之间的经验数学模型。复合酶中各种酶制剂的最适配比为4:2:1:3。莲花蜂花粉酶解破壁的最佳条件为酶解pH4.0、复合酶加入量12‰、酶解温度45℃、料水比1:14(g/mL),破壁率89.21%。

摘要：一、“新”媒介——摄影作为艺术媒介摄影作为媒介似乎从哪方面来说都不能称之新,它本身存在一百多年了。从当代艺术对“新媒介”的定义来看,所谓新媒介,是艺术家用独特的方式运用不同于艺术史上已经出现过的某种新的介质来做作品,这种介质可以是人类社会和自然界中的几乎任何一种物质。我们把摄影作为新媒介来看待,只不过是在我们以往的美术表现媒介这个意义上把它看作“新媒介”的,它有这样一些特点:这种摄影更多的是用来表达我们主观的感受、情感和思想、幻想和梦,从这个意义上说。

摘要：采用均匀设计的方法,筛选油菜蜂花粉软胶囊复配乳化稳定剂配方.采用SAS统计软件对试验结果进行多元回归分析,确定了最优配方为:蜂蜡6.5 g;单甘脂5.5 g;吐温0.35 g;司盘80 1.10 g;硬脂酸0.35 g.

摘要：蜜蜂巢脾是一种营养丰富,具有多种生物学功能的蜂疗保健品。为丰富蜜蜂巢脾产品种类,通过真空冷冻干燥生产工艺,选用正交设计,以成型性、口感、速溶性、吸湿性等为指标,综合评选,研制了一种蜜蜂巢脾冻干粉产品。其辅料糊精、乳糖、β-环糊精、PVP添加量分别为25%、15%、25%、3%。吸湿速率较小,30℃条件下,临界相对湿度为75%,生产易于控制。

摘要：为获得低毒、具有抗肿瘤和抗菌活性的长效改性蜂毒肽,提高蜂毒肽的临床应用价值,本试验以多肽构效关系为指导,选择两亲性α-螺旋型阳离子多肽分子结构为改性蜂毒肽的设计模板,用杂合肽法设计了一系列多肽序列,用生物信息学工具比较它们的生物活性并进行初选,再用固相法合成初选所得少量序列的多肽,比对合成多肽的生物活性,精选获得生物活性高的多肽。实验表明精选所得多肽具有长效性,确定其为设计目标肽(GPG),当GPG浓度为150μmol/L时,其溶血率为零;浓度为33.3μmol/L时,其对小鼠肝癌细胞(H22)、人肝癌细胞(SMMC-7721)和人结肠癌细胞(SW-1116)的抑癌率分别为(78.0±0.6)%、(74.0±1.2)%、(74.0±0.5)%;浓度为100μmol/L时,其对大肠杆菌的抑菌圈直径为(15.18±0.30) mm;当注射GPG(100μmol/只)时,能延长致死剂量大肠杆菌(5×107个/只)攻毒的小鼠寿命63.2 h。该设计省时省力地优选得溶血活性低、抗癌抗菌活性强、半衰期长的全新结构目标肽GPG,其有临床应用前景;以GRGDSP肽链为多肽氮端端基,可提高其生物活性及半衰期。

摘要：[目的]克隆中华蜜蜂(Apis cerana cerana)AcerOBP7基因并分析其相关生物学信息。[方法]收集中华蜜蜂样本,提取总RNA,反转录制备cDNA。设计特异性引物,PCR扩增AcerOBP7基因的ORF序列。利用多种生物信息学软件对编码蛋白的理化性质和结构特征进行预测和分析。[结果]获得中华蜜蜂气味结合蛋白基因AcerOBP7的cDNA序列。AcerOBP7基因的开放阅读框(ORF)长438 bp,编码145个氨基酸。存在信号肽,无跨膜结构,在53~140个氨基酸之间有一个昆虫气味结合蛋白家族的PBP-GOBP家族的保守结构域,信号肽源于氨基酸中的1~20位,其对应的剪切位点落在氨基酸中的20位与21位间。有一些相对清晰的疏水区。[结论]AcerOBP7蛋白属于Classical OBP亚家族,具有典型的PBP-GOBP家族结构,是一种分泌蛋白。

摘要：以意大利蜜蜂α-葡萄糖苷酶基因(GenBank登录号NM_001040259)的保守区设计引物,从中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂中提取总RNA,逆转录成cDNA,进行RT-PCR,将扩增产物克隆到pGEM-T easy载体上,导入大肠杆菌JM109,阳性克隆经双酶切鉴定后测序,将测序得到的中华蜜蜂α-葡萄糖苷酶(alpha-glucosi-dase)基因与已知的意大利蜜蜂核苷酸序列比较,同源性为91.31%。氨基酸序列与意大利蜜蜂、黑腹果蝇、埃及斑蚊、冈比亚按蚊、印度蜜蜂、小蜜蜂、非洲爪蟾、日本蜜蜂、赤拟谷盗、尖音库蚊的同源性分别为90.83%、48.11%、47.28%、45.74%、42.25%、41.21%、38.10%、37.93%、35.56%、33.88%。首次从中华蜜蜂工蜂中成功扩增到长度为745 bp、编码α-葡萄糖苷酶(alpha-glucosidase)的基因片段(已提交GenBank,登录号为EF638842)。

摘要：为从中华蜜蜂蜂毒中扩增蛋白酶(Protease)基因,根据意大利蜜蜂蜂毒蛋白酶基因(GenBank登录号NM_001011584)的保守区设计引物,从中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂毒腺中快速抽提总RNA,将从毒腺中扩增出的产物克隆到pGEM-Teasy载体上,导入大肠杆菌JM109,阳性克隆经双酶切鉴定后测序,将测序得到的中华蜜蜂蛋白酶基因与已知的意大利蜜蜂核苷酸序列比较,同源性为95.22%。氨基酸序列分别与意大利蜜蜂、玉米螟、胡蜂、冈比亚按蚊、棉铃象甲虫、埃及斑蚊、热带爪蟾、棕尾别麻蝇、广盐螯虾、亚马逊蝮蛇进行同源性比较,同源性分别为91.71%、46.70%、41.94%、41.21%、39.56%、38.38%、37.35%、36.17%、34.24%、28.49%。本试验首次成功从中华蜜蜂工蜂毒腺中扩增到长度为545 bp、编码蛋白酶的基因片段,所得序列已提交Gen-Bank,登录号为:EF547156,这为以后克隆该基因全长序列以及利用基因工程技术进行蜂毒产业化开发奠定一定的基础。